中国樱桃(Prunus pseudocerasus Lindl.)IRAP分子标记技术体系的建立

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基于中国樱桃LTR类反转录转座子的反转录酶(RT)序列信息设计引物,并根据扩增谱带的数量、多态性和可重复性等指标筛选IRAP-PCR引物;采用5因素4水平L 16(45)的完全随机正交试验,对影响PCR体系的主要因子进行优化,建立了中国樱桃IRAP分子标记反应体系。结果表明,筛选出9条引物,可以扩增222个清晰位点,位点的平均多态性比率为90.09%。PCR的最佳反应体系为25μL,含2.0 mmol·L^-1 MgCl 2、1.0 U Taq酶、0.2 mmol·L^-1引物、20
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