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摘要：目的：评价双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的效果。方法：选取我院2015年8月～2017年3月期间送检的疑似血流感染的血液标本2060例，1442例采用双套学血培养法，618例采用单套血培养法，统计血培养阳性结果。结果：双瓶阳性检出率为6.2%（89/1442），检出病原菌主要为肠杆菌科细菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金葡菌；单瓶阳性检出率为9.3%（134/1442），检出病原菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌、肠杆菌科细菌和不发酵糖革兰阴性杆菌，总阳性检出率为15.5%（223/1442）。单瓶阳性结果中凝固酶阴性葡萄球菌、不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率分別明显高于双瓶阳性结果，P<0.05，差异具有统计学意义。结论：双套血培养可有效提高血流感染检出率，有利于鉴别分离菌的污染，值得推广应用。
关键词：双套血培养；血流感染；检出率；污染鉴别
血流感染一种常见的临床感染类型，致死率较高，有报道显示因血流感染而死亡的病例数约占全部感染致死病例数的12%～35%左右[1]，因此，及时诊断血流感染并给予有效处理对提高患者治愈率及降低病死率具有重要意义。血培养是诊断血流感染的有效手段之一，但目前存在的血培养阳性检出率低和污染所致假阳性问题引起了人们的关注，如何提高血流感染阳性检出率并有效鉴别分离菌是否污染成为了临床医师和微生物实验室所面临的一道难题。为评价双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的效果，本文选取了我院2015年8月～2017年3月期间送检的疑似血流感染的血液标本2060例进行研究，现报道如下。
1材料与方法
1.1材料
法国生物梅里埃公司生产的3D60血培养全自动系统，法国生物梅里埃公司生产的ATB细菌半自动鉴定系统及配套血平板培养瓶。
1.2方法
1.2.1血液标本的采集
单套血培养：于1个皮肤穿刺点抽取血液标本，单独进行需氧培养，或同时进行需氧和厌氧培养。双套血培养：于患者左右上肢皮肤穿刺点抽取血液标本各20mL，分别收集于需氧瓶和厌氧瓶中，两套血培养的抽取间隔时间应控制在5min以内。
1.2.2定义
双套血培养两瓶血液标本均检出同一种病原菌记为双瓶阳性，只有一瓶血液标本检出病原菌记为单瓶阳性。
1.2.3研究对象
收集2015年8月～2017年3月期间2060例疑似血流感染住院患者的病历资料，回顾性分析血液标本进行双套血培养的结果。
1.2.4统计学方法
采用统计学软件SPSS19.0进行数据处理，计量资料和计数资料分别以（ ）、[例（%）]的形式进行表示，分别采用t、χ2检验。两组数据进行比较若得出P<0.05，则视为差异具有统计学意义。
2结果
2.1双套血培养阳性检出率
送检的2060例疑似血流感染血液标本中1442例（70.0%）采用双套学血培养法，618例（30.0%）采用单套血培养法。1442例双套血培养标本中共检出阳性223例，阳性检出率为15.5%，其中单瓶阳性134例，双瓶阳性89例。单瓶阳性结果中肠杆菌科细菌的检出率明显低于双瓶阳性结果，凝固酶阴性葡萄球菌检出率明显高于双瓶阳性结果（P<0.05），详见表1。
2.2双套血培养阳性结果污染鉴别
单瓶阳性结果中凝固酶阴性葡萄球菌、不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率分别明显高于双瓶阳性结果，P<0.05，差异具有统计学意义。详见表2。
3讨论
血流感染的病原菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌和真菌，一项血培养试验显示，血培养阳性结果中，检出的凝固酶阴性葡萄球菌占到了所有病原菌总数的18.9%，大肠埃希菌占到了10.7%，真菌呢占到了9.5%；国外的一项研究则指出医院获得性血流感染的主要病原菌为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和假丝酵母菌属，社区获得性血流感染的主要病原均为草绿色链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和大肠埃希菌，本次研究中检出最多的为凝固酶阴性葡萄球菌和肠杆菌科细菌，分别占到了阳性结果的35.4%（79/223）和25.1%（56/223）。
影响血培养检出率的因素有采血时间、采血量、血培养瓶数等，多项研究表明多套血液标本进行血培养可提高病原菌的检出率，有数据显示当每套血培养采血量相同时，单套血培养的检出率在50%左右，两套血培养的检出率在80%左右，三套血培养的检出率则高达90%左右[2]。本次研究中2060例送检血培养标本中行双套血培养1442例，阳性检出率为15.5%，其中双瓶阳性检出率为6.2%（89/1442），检出病原菌主要为肠杆菌科细菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金葡菌，单瓶阳性检出率为9.3%（134/1442），检出病原菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌、肠杆菌科细菌和不发酵糖革兰阴性杆菌。一般认为凝固酶阴性葡萄球菌为血培养中最常见的分离菌，可占血培养分离菌总数的45%左右[3]，本次研究中双套血培养阳性结果中共检出凝固酶阴性葡萄球菌79例，占到了分离菌总数的35.4%，明显高于其他类型的分离菌，也说明了这一点。凝固酶阴性葡萄球菌占比可能与采集血液时常规碘伏消毒不规范，皮肤毛囊内常居病原菌污染有关。
血培养污染是影响血流感染诊断准确性的重要因素[4]，本次研究中双套血培养阳性结果中主要污染的分离菌为凝固酶阴性葡萄球菌，共污染64例，占到了分离凝固酶阴性葡萄球菌总数的81.0%（64/79）；其次是不发酵糖革兰阴性杆菌，污染5例，占比23.8%（5/21）；分离出的肠杆菌科细菌和金葡菌未见污染。单瓶阳性结果中凝固酶阴性葡萄球菌、不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率分别明显高于双瓶阳性结果，这提示单瓶阳性检出的凝固酶阴性葡萄球菌和不发酵糖革兰阴性杆菌污染的可能性较大，但如果双套血培养时仅有厌氧瓶显示阳性，应作需氧厌氧配对血培养以避免病原菌的漏检。双瓶阳性检出的凝固酶阴性葡萄球菌和不发酵糖革兰阴性杆菌可能需进一步作药敏试验以鉴别是否污染[5]，当不同皮肤穿刺点采血进行双套血培养时，如果只有一个部位的血标本检出病原菌，特别是检出凝固酶阴性葡萄球菌时，可基本判断为污染。本次研究中由于其他病原菌不具代表性，样本量也较少，因此不作为有价值的统计数据进行分析。王坚镪[6]等在同类研究中得出送检出的3151例双套血培养标本中共检出483例阳性，阳性检出率为15.33%，与本次研究结果的15.5%基本一致；双瓶阳性率为6.09%，单瓶阳性率为9.23%，在鉴别双套血培养污染中得出双瓶阳性结果中，凝固酶阴性葡萄球菌污染的比率只占到了10.71%，远低于单瓶阳性结果中的96.52%；未发现不发酵糖革兰阴性杆菌污染，而单瓶阳性结果中不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率达到了37.04%，与本次研究结果一致，进一步说明了双套血培养有助于血流感染的诊断，较于单套血培养可降低漏检率，且有助于污染的鉴别。
综上所述，可知双套血培养可有效提高血流感染检出率，有利于鉴别分离菌的污染，值得推广应用。为进一步有效鉴别血培养污染可增加血培养送检套数，可结合血培养阳性报告时间进行进一步的鉴别。
参考文献：
[1]凌云映，张竞，刘晓一等.不同采血模式下血培养结果的分析[J].国际检验医学杂志，2016，37（20）：2893-2895.
[2]雷莹，林春丽，傅清流等.新生儿双瓶血培养与单瓶血培养病原菌分布及其检出率情况[J].基层医学论坛，2016，20（28）：3990-3991.
[3]黄声雷，胡必杰，谢红梅等.血培养报阳瓶数对凝固酶阴性葡萄球菌血流感染鉴别诊断的价值[J].中华医院感染学杂志，2014，（10）：2592-2594.
[4]黄有平，李珺.血培养检出病原菌分布及双份血培养法的价值分析[J].国际检验医学杂志，2015，（20）：2994-2996.
[5]殷琳.双瓶配对血培养对于提高阳性检出率的意义[J].中国保健营养（下旬刊），2014，24（4）：2337-2338.
[6]王坚镪，汤瑾，庄亦晖等.双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的评价[J].中国感染与化疗杂志，2012，12（6）：440-442.
关键词：双套血培养；血流感染；检出率；污染鉴别
血流感染一种常见的临床感染类型，致死率较高，有报道显示因血流感染而死亡的病例数约占全部感染致死病例数的12%～35%左右[1]，因此，及时诊断血流感染并给予有效处理对提高患者治愈率及降低病死率具有重要意义。血培养是诊断血流感染的有效手段之一，但目前存在的血培养阳性检出率低和污染所致假阳性问题引起了人们的关注，如何提高血流感染阳性检出率并有效鉴别分离菌是否污染成为了临床医师和微生物实验室所面临的一道难题。为评价双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的效果，本文选取了我院2015年8月～2017年3月期间送检的疑似血流感染的血液标本2060例进行研究，现报道如下。
1材料与方法
1.1材料
法国生物梅里埃公司生产的3D60血培养全自动系统，法国生物梅里埃公司生产的ATB细菌半自动鉴定系统及配套血平板培养瓶。
1.2方法
1.2.1血液标本的采集
单套血培养：于1个皮肤穿刺点抽取血液标本，单独进行需氧培养，或同时进行需氧和厌氧培养。双套血培养：于患者左右上肢皮肤穿刺点抽取血液标本各20mL，分别收集于需氧瓶和厌氧瓶中，两套血培养的抽取间隔时间应控制在5min以内。
1.2.2定义
双套血培养两瓶血液标本均检出同一种病原菌记为双瓶阳性，只有一瓶血液标本检出病原菌记为单瓶阳性。
1.2.3研究对象
收集2015年8月～2017年3月期间2060例疑似血流感染住院患者的病历资料，回顾性分析血液标本进行双套血培养的结果。
1.2.4统计学方法
采用统计学软件SPSS19.0进行数据处理，计量资料和计数资料分别以（ ）、[例（%）]的形式进行表示，分别采用t、χ2检验。两组数据进行比较若得出P<0.05，则视为差异具有统计学意义。
2结果
2.1双套血培养阳性检出率
送检的2060例疑似血流感染血液标本中1442例（70.0%）采用双套学血培养法，618例（30.0%）采用单套血培养法。1442例双套血培养标本中共检出阳性223例，阳性检出率为15.5%，其中单瓶阳性134例，双瓶阳性89例。单瓶阳性结果中肠杆菌科细菌的检出率明显低于双瓶阳性结果，凝固酶阴性葡萄球菌检出率明显高于双瓶阳性结果（P<0.05），详见表1。
2.2双套血培养阳性结果污染鉴别
单瓶阳性结果中凝固酶阴性葡萄球菌、不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率分别明显高于双瓶阳性结果，P<0.05，差异具有统计学意义。详见表2。
3讨论
血流感染的病原菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌和真菌，一项血培养试验显示，血培养阳性结果中，检出的凝固酶阴性葡萄球菌占到了所有病原菌总数的18.9%，大肠埃希菌占到了10.7%，真菌呢占到了9.5%；国外的一项研究则指出医院获得性血流感染的主要病原菌为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和假丝酵母菌属，社区获得性血流感染的主要病原均为草绿色链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和大肠埃希菌，本次研究中检出最多的为凝固酶阴性葡萄球菌和肠杆菌科细菌，分别占到了阳性结果的35.4%（79/223）和25.1%（56/223）。
影响血培养检出率的因素有采血时间、采血量、血培养瓶数等，多项研究表明多套血液标本进行血培养可提高病原菌的检出率，有数据显示当每套血培养采血量相同时，单套血培养的检出率在50%左右，两套血培养的检出率在80%左右，三套血培养的检出率则高达90%左右[2]。本次研究中2060例送检血培养标本中行双套血培养1442例，阳性检出率为15.5%，其中双瓶阳性检出率为6.2%（89/1442），检出病原菌主要为肠杆菌科细菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金葡菌，单瓶阳性检出率为9.3%（134/1442），检出病原菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌、肠杆菌科细菌和不发酵糖革兰阴性杆菌。一般认为凝固酶阴性葡萄球菌为血培养中最常见的分离菌，可占血培养分离菌总数的45%左右[3]，本次研究中双套血培养阳性结果中共检出凝固酶阴性葡萄球菌79例，占到了分离菌总数的35.4%，明显高于其他类型的分离菌，也说明了这一点。凝固酶阴性葡萄球菌占比可能与采集血液时常规碘伏消毒不规范，皮肤毛囊内常居病原菌污染有关。
血培养污染是影响血流感染诊断准确性的重要因素[4]，本次研究中双套血培养阳性结果中主要污染的分离菌为凝固酶阴性葡萄球菌，共污染64例，占到了分离凝固酶阴性葡萄球菌总数的81.0%（64/79）；其次是不发酵糖革兰阴性杆菌，污染5例，占比23.8%（5/21）；分离出的肠杆菌科细菌和金葡菌未见污染。单瓶阳性结果中凝固酶阴性葡萄球菌、不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率分别明显高于双瓶阳性结果，这提示单瓶阳性检出的凝固酶阴性葡萄球菌和不发酵糖革兰阴性杆菌污染的可能性较大，但如果双套血培养时仅有厌氧瓶显示阳性，应作需氧厌氧配对血培养以避免病原菌的漏检。双瓶阳性检出的凝固酶阴性葡萄球菌和不发酵糖革兰阴性杆菌可能需进一步作药敏试验以鉴别是否污染[5]，当不同皮肤穿刺点采血进行双套血培养时，如果只有一个部位的血标本检出病原菌，特别是检出凝固酶阴性葡萄球菌时，可基本判断为污染。本次研究中由于其他病原菌不具代表性，样本量也较少，因此不作为有价值的统计数据进行分析。王坚镪[6]等在同类研究中得出送检出的3151例双套血培养标本中共检出483例阳性，阳性检出率为15.33%，与本次研究结果的15.5%基本一致；双瓶阳性率为6.09%，单瓶阳性率为9.23%，在鉴别双套血培养污染中得出双瓶阳性结果中，凝固酶阴性葡萄球菌污染的比率只占到了10.71%，远低于单瓶阳性结果中的96.52%；未发现不发酵糖革兰阴性杆菌污染，而单瓶阳性结果中不发酵糖革兰阴性杆菌的污染率达到了37.04%，与本次研究结果一致，进一步说明了双套血培养有助于血流感染的诊断，较于单套血培养可降低漏检率，且有助于污染的鉴别。
综上所述，可知双套血培养可有效提高血流感染检出率，有利于鉴别分离菌的污染，值得推广应用。为进一步有效鉴别血培养污染可增加血培养送检套数，可结合血培养阳性报告时间进行进一步的鉴别。
参考文献：
[1]凌云映，张竞，刘晓一等.不同采血模式下血培养结果的分析[J].国际检验医学杂志，2016，37（20）：2893-2895.
[2]雷莹，林春丽，傅清流等.新生儿双瓶血培养与单瓶血培养病原菌分布及其检出率情况[J].基层医学论坛，2016，20（28）：3990-3991.
[3]黄声雷，胡必杰，谢红梅等.血培养报阳瓶数对凝固酶阴性葡萄球菌血流感染鉴别诊断的价值[J].中华医院感染学杂志，2014，（10）：2592-2594.
[4]黄有平，李珺.血培养检出病原菌分布及双份血培养法的价值分析[J].国际检验医学杂志，2015，（20）：2994-2996.
[5]殷琳.双瓶配对血培养对于提高阳性检出率的意义[J].中国保健营养（下旬刊），2014，24（4）：2337-2338.
[6]王坚镪，汤瑾，庄亦晖等.双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的评价[J].中国感染与化疗杂志，2012，12（6）：440-442.