大鼠肢体缺血再灌注急性肺损伤细胞自噬及其相关蛋白的表达

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目的研究大鼠双下肢缺血再灌注所致急性肺损伤(LIR-ALI)肺组织细胞早期自噬及其相关蛋白的表达。方法采用LIR-ALI模型,12只雄性SD大鼠,以随机数字表法分为假手术(Sham)组,肢体缺血再灌注(I/R)组,每组6只。采用ELISA检测血清白乳酸脱氢酶(LDH)和免疫荧光法检测肺组织病理变化,利用RT-PCR检测各组肺组织Beclin1和Atg5mRNA表达及Western blot检测LC3蛋白的表达。结果与Sham组比较,I/R组LDH值升高,显示大鼠LIR-ALI模型造模成功且肺组织免疫荧光特异性标记抗体高表达(P<0.01)。采用2-△△CT法分析肺组织Beclin1和Atg5mRNA相对表达量,在I/R组较Sham组升高(P<0.01);Western blot法检测显示,I/R组较Sham组LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ高表达、LC3-Ⅱ/GAPDH亦明显升高(P<0.01)。结论大鼠LIR-ALI后激活肺组织细胞自噬及其相关蛋白高表达。
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