【摘 要】
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为鉴定鸭肠炎病毒（DEV）的非必需基因,本研究利用增强型绿色蛋白（EGFP）基因为报告基因,通过在转染的鸡胚成纤维细胞（CEF）中同源重组,将其插入DEV基因组的TK基因中,经筛选和纯化绿色
【机 构】
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甘肃农业大学动物医学学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室
【基金项目】
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蛋鸡体系（CAR-41-K12）, 国家科技支撑计划课题（2015BAD12B03）
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为鉴定鸭肠炎病毒（DEV）的非必需基因,本研究利用增强型绿色蛋白（EGFP）基因为报告基因,通过在转染的鸡胚成纤维细胞（CEF）中同源重组,将其插入DEV基因组的TK基因中,经筛选和纯化绿色荧光病毒蚀斑,获得表达EGFP的重组DEV,命名为r DEVTK-EGFP。对重组病毒与亲本病毒DEV Clone-03复制动力学比较结果显示,重组病毒滴度显著低于亲本病毒（p〈0.01）。对重组病毒在复制过程中感染细胞能力和荧光表达时相检测结果表明,在感染后48 h~72 h表达荧光信号细胞明显增多,该结果与重组病毒
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