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目的建立乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区PCR产物测序方法,检测HBV耐药突变位点及基因型。方法采用了巢式PCR方法,分别在HBV基因组逆转录(RT)区头尾设计内外两对引物,扩增全长RT区1 223bp序列。并用该方法对已经完成测序的HBV B、C基因型,拉米夫定耐药株,恩替卡韦耐药株全长重组质粒扩增RT区来验证方法的保真度;用该方法从病毒载量1×103~1×108 copys/mL HBV血清中扩增RT区来验证方法的灵敏度;通过对4例临床标本的检测来验证方法的实用性。结果建立了乙型肝