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摘要 [目的]分析不同组培枣树品种之间叶片气孔大小、数量及其变异范围。[方法]以组培继代的14个枣树品种为材料，采用透明胶布黏取法对其叶下表皮气孔的数量和大小进行研究。[结果]14个枣树品种组培苗叶片气孔长度在12.27～20.23 μm，气孔宽度在11.20～16.37 μm，气孔密度在41.25 ～138.60个/mm2。[结论]长圆酸枣的枣树组培苗叶片气孔密度显著大于其余几个品种，但气孔长度明显小于其他品种，其是否具有较强的抗性还需进一步研究。
关键词 枣树；叶片；气孔
中图分类号 S793 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）20-059-02
Abstract [Objective]The stomatal size， quantity， and its variation range of different jujube varieties were studied.[Method]Taking 14 jujube varieties as the materials， transparent tape method was used to study the leaf stomatal number and size.[Result]The research results showed that the 14 jujube varieties stomatal length between 12.27-20.23 μm， stomatal width between 11.20-16.37 μm， stomatal density between 41.25-138.60 holes/mm2.[Conclusion]Changyuan sour jujube stomatal density was significantly greater than the rest of the several varieties， but stomatal length was much smaller than other varieties.
Key words Jujube； Lamina； Stoma
棗树是鼠李科落叶灌木或小乔木，我国秦晋交界的黄河峡谷地带是枣树的主栽区和丰产区[1]。气孔是植物叶片与外界进行气体和水分交换的主要通道，在木本植物系统进化和分类方面具有积极意义[2]。该研究对陕西省红枣重点实验室组培的14个红枣品种组培苗叶片气孔数量进行统计，对不同组培枣树品种之间气孔大小、数量及其变异范围进行分析，以期为丰富枣树气孔性状资料，枣树优质高抗植株的筛选及核心种质资源的构建提供气孔性状方面的依据。
1 材料与方法
1.1 材料来源及培养方法
试验材料取自陕西省红枣重点实验室（延安大学）组培快繁的14个室内继代红枣品种。分别为京枣、大圆酸枣、长圆酸枣、木枣、大木枣、木18、木23、木Q2、木变、Z21、木4n、晋枣、晋枣单倍体、狗头枣。用Cy4+6BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L + TDZ 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L，pH 6.8 的基质继代培养，在温度（24±2）℃、相对湿度（75±5）%、光照时间12 h/d，光照强度（1 500±200）Lx的条件下培养25 d。
1.2 取材方法
选取从顶端向下完全展开的3片叶子作为试验用材料，用透明胶布黏取气孔。
1.3 气孔观察
将黏有叶片下表皮的胶带放入95%的酒精中脱色10～30 s，用1%的 IKI混合溶液对材料进行染色后，显微镜观察统计、拍照记录。
1.4 数据分析
显微镜下视野内的气孔数目为N，测微尺测量的视野半径为d，每1个枣树品种随机观察30个植株共计90片叶子，每片叶子观察20个视野，每个视野随机选取5个气孔测量长度和宽度。每个品种得到1 800个密度数据，9 000个长度、宽度数据。
气孔密度（个/mm2）=N/（3.14×d2）。数据差异依据统计学原理，用Excel 2010进行分析。
2 结果与分析
2.1 14个品种枣树组培苗气孔数量
由表1可知，气孔数量变化范围为41.25～138.60个/mm2。其中京枣气孔数量为111.15个/mm2，变异系数为0.20；大圆酸枣气孔数量为115.20个/mm2，变异系数为0.14；长圆酸枣气孔数量为138.60个/mm2，变异系数为0.12，是14个品种中气孔平均数量最多的品种；木枣气孔数量为46.50个/mm2，变异系数为0.24；大木枣气孔数量为47.70个/mm2，变异系数为0.21；木18气孔数量为51.45个/mm2，变异系数为0.39；木23气孔数量为41.25个/mm2，变异系数为0.22，是14个品种中气孔平均数量最少的品种；木Q2气孔数量为54.60个/mm2，变异系数为0.19；木变气孔数量为64.95个/mm2，变异系数为0.16；Z21气孔数量为41.40个/mm2，变异系数为0.35；木4n气孔数量为53.85个/mm2，变异系数为0.28；晋枣气孔数量为108.60个/mm2，变异系数为0.28；晋枣单倍体气孔数量为85.95个/mm2，变异系数为0.24；狗头枣气孔数量为64.65个/mm2，变异系数为0.19。
2.2 气孔长度与宽度性状 由表1可知，14个枣树品种气孔长度在12.27～20.23 μm。其中木23气孔最长为20.23 μm，大圆酸枣气孔长度最小为12.27 μm。在14个枣树品种中京枣、大圆酸枣、晋枣的气孔长度在12～14 μm之间，属于气孔长度较小的品种。狗头枣、晋枣单倍体、木18、木变、长圆酸枣的气孔长度在14～16 μm之间，属于气孔长度中等的品种。Z21、木4n、木Q2的气孔长度在16～18 μm之间，属于气孔长度较大的品种。大木枣、木枣的气孔长度在18～20 μm之间，属于气孔长度大的品种。木23的气孔长度为20.23 μm，是14个枣树品种中气孔长度最长的品种。14个枣树品种气孔长度的变异系数都在0.10以上，Z21枣树气孔长度变异系数最小为0.11，长圆酸枣变异系数最大为0.20。 14个枣树品种气孔宽度在11.20～16.37 μm。其中木23气孔最宽为16.37 μm，大圆酸枣气孔宽度最小为11.20 μm。14个枣树品种中京枣、大圆酸枣的气孔宽度在10～12 μm之间，属于气孔宽度较小的品种。Z21、狗头枣、晋枣、晋枣单倍体、木18、木变、长圆酸枣的气孔宽度在12～14 μm，属于气孔宽度中等的品种。大木枣、木4 n、木枣、木Q2的氣孔宽度在14～16 μm之间，属于气孔宽度较大的品种。木23的气孔宽度为16.37 μm，是14个枣树品种中气孔宽度最宽的品种。14个枣树品种气孔宽度的变异系数中，除了木叶、Z21和木18的变异系数在0.09，其余都在0.10以上，在14个枣树品种中气孔宽度变异系数最大的是长圆酸枣，它的变异系数为0.19。
3 结论与讨论
（1）组培苗叶片和大田苗叶片相比，比较幼嫩，所以在黏取时要轻拿轻放。具体做法是将透明胶布撕开的一端先用解剖针水平固定在实验台上，然后将组培苗叶片上表皮放在胶布上，再反折过来，将下表皮压实，用力将胶布撕开就能获得较好的下表皮黏取效果。经过染色后，整体贴在载玻片上观察。与段云峰等[3]提供的方法（用普通塑料透明胶带黏贴植物叶片下表皮，再刮去叶肉细胞保留叶片表皮观察气孔）比，该方法采用反向黏取，更适合获得幼嫩叶片气孔。
（2）气孔是植物与外界环境进行气体、水分交换的通道， 与其光合作用、呼吸作用和蒸腾作用都有密切的关系[4]。组培枣树气孔见图1。研究枣树的气孔密度、大小及在胁迫条件下气孔的开闭规律对研究其适应性、抗逆性有密切的关系。该研究中14个枣树品种气孔长度在12.27～20.23 μm，气孔宽度在11.20～16.37 μm，气孔密度在41.25～138.60个/mm2。柴慈江等[5]研究了枣树试管苗气孔的开闭规律，这些研究是在炼苗过程进行的。齐向英等[6]研究发现组培木枣、组培狗头枣气孔密度分别为86.34、61.94个/mm2，与该研究结果不同，其原因可能是该研究的材料为继代培养的组培苗，而他们用的材料为大田移栽定植的组培苗。
（3）齐向英[7]、曹娟云[8]等同样用透明胶布黏取法研究了在延川县分布的12个枣树品种和赞皇大枣的气孔。发现12个枣树品种气孔长度在24.64～30.43 μm，气孔宽度在19.83～23.26 μm，气孔数量在66.37～101.60个/mm2，赞皇大枣叶面气孔数量平均值为95.27个/mm2。刘世鹏[9]、黄丽萍[10]的研究表明抗裂品种在气孔密度、气孔大小、气孔开度3个方面的平均值均大于易裂品种。在该研究中，长圆酸枣的枣树气孔密度显著大于其余几个品种，但气孔长度明显小于其他品种，该品种是否具有较强的抗性，还需要进一步的研究。
参考文献
[1]曲泽洲，王永蕙.中国果树志：枣卷[M].北京：中国林业出版社，1993.
[2] 马丁.气孔[M].张崇浩，译.北京：科学出版社，1987：1-73.
[3] 段云峰，王幼宁，李霞.一种获得叶片表皮观察气孔的简易方法及其应用[J].华北农学报，2008，23（S1）：73-76.
[4] SUN Z R，WANG M Y，ZHANG H G，et al.Comparison of stomatal characteristics between Dendrobium loddigesii and Dendrobium candidum[J].Agricultural Science& Technology， 2011， 12（8）：1161-1165.
[5] 柴慈江，张磊，杨恩芹.枣试管苗气孔开闭状况观察[J].天津农业科学，1996，123（2）：5-6.
[6] 齐向英，陈宗礼，张向前，等.三种组培枣树气孔研究初报[J].福建林业科技，2006，33（3）：158-160.
[7] 齐向英，齐龙，赵鹏飞，等.12个枣树品种叶片气孔性状研究[J].江苏农业科学，2009（3）：199-200.
[8] 曹娟云，周茂林，丁媛媛，等.赞皇大枣气孔和叶绿素含量初探[J].江苏农业科学，2011，39（6）：330-331.
[9] 刘世鹏，曹娟云，陈宗礼，等.5个抗裂枣树品种气孔性状研究[J].福建林业科技，2011，38（3）：85-87.
[10] 黄丽萍，刘和，陈晓东，等.裂果性不同枣品种叶片气孔特性观察[J].山西林业科技，2004（4）：8-12.
关键词 枣树；叶片；气孔
中图分类号 S793 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）20-059-02
Abstract [Objective]The stomatal size， quantity， and its variation range of different jujube varieties were studied.[Method]Taking 14 jujube varieties as the materials， transparent tape method was used to study the leaf stomatal number and size.[Result]The research results showed that the 14 jujube varieties stomatal length between 12.27-20.23 μm， stomatal width between 11.20-16.37 μm， stomatal density between 41.25-138.60 holes/mm2.[Conclusion]Changyuan sour jujube stomatal density was significantly greater than the rest of the several varieties， but stomatal length was much smaller than other varieties.
Key words Jujube； Lamina； Stoma
棗树是鼠李科落叶灌木或小乔木，我国秦晋交界的黄河峡谷地带是枣树的主栽区和丰产区[1]。气孔是植物叶片与外界进行气体和水分交换的主要通道，在木本植物系统进化和分类方面具有积极意义[2]。该研究对陕西省红枣重点实验室组培的14个红枣品种组培苗叶片气孔数量进行统计，对不同组培枣树品种之间气孔大小、数量及其变异范围进行分析，以期为丰富枣树气孔性状资料，枣树优质高抗植株的筛选及核心种质资源的构建提供气孔性状方面的依据。
1 材料与方法
1.1 材料来源及培养方法
试验材料取自陕西省红枣重点实验室（延安大学）组培快繁的14个室内继代红枣品种。分别为京枣、大圆酸枣、长圆酸枣、木枣、大木枣、木18、木23、木Q2、木变、Z21、木4n、晋枣、晋枣单倍体、狗头枣。用Cy4+6BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L + TDZ 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L，pH 6.8 的基质继代培养，在温度（24±2）℃、相对湿度（75±5）%、光照时间12 h/d，光照强度（1 500±200）Lx的条件下培养25 d。
1.2 取材方法
选取从顶端向下完全展开的3片叶子作为试验用材料，用透明胶布黏取气孔。
1.3 气孔观察
将黏有叶片下表皮的胶带放入95%的酒精中脱色10～30 s，用1%的 IKI混合溶液对材料进行染色后，显微镜观察统计、拍照记录。
1.4 数据分析
显微镜下视野内的气孔数目为N，测微尺测量的视野半径为d，每1个枣树品种随机观察30个植株共计90片叶子，每片叶子观察20个视野，每个视野随机选取5个气孔测量长度和宽度。每个品种得到1 800个密度数据，9 000个长度、宽度数据。
气孔密度（个/mm2）=N/（3.14×d2）。数据差异依据统计学原理，用Excel 2010进行分析。
2 结果与分析
2.1 14个品种枣树组培苗气孔数量
由表1可知，气孔数量变化范围为41.25～138.60个/mm2。其中京枣气孔数量为111.15个/mm2，变异系数为0.20；大圆酸枣气孔数量为115.20个/mm2，变异系数为0.14；长圆酸枣气孔数量为138.60个/mm2，变异系数为0.12，是14个品种中气孔平均数量最多的品种；木枣气孔数量为46.50个/mm2，变异系数为0.24；大木枣气孔数量为47.70个/mm2，变异系数为0.21；木18气孔数量为51.45个/mm2，变异系数为0.39；木23气孔数量为41.25个/mm2，变异系数为0.22，是14个品种中气孔平均数量最少的品种；木Q2气孔数量为54.60个/mm2，变异系数为0.19；木变气孔数量为64.95个/mm2，变异系数为0.16；Z21气孔数量为41.40个/mm2，变异系数为0.35；木4n气孔数量为53.85个/mm2，变异系数为0.28；晋枣气孔数量为108.60个/mm2，变异系数为0.28；晋枣单倍体气孔数量为85.95个/mm2，变异系数为0.24；狗头枣气孔数量为64.65个/mm2，变异系数为0.19。
2.2 气孔长度与宽度性状 由表1可知，14个枣树品种气孔长度在12.27～20.23 μm。其中木23气孔最长为20.23 μm，大圆酸枣气孔长度最小为12.27 μm。在14个枣树品种中京枣、大圆酸枣、晋枣的气孔长度在12～14 μm之间，属于气孔长度较小的品种。狗头枣、晋枣单倍体、木18、木变、长圆酸枣的气孔长度在14～16 μm之间，属于气孔长度中等的品种。Z21、木4n、木Q2的气孔长度在16～18 μm之间，属于气孔长度较大的品种。大木枣、木枣的气孔长度在18～20 μm之间，属于气孔长度大的品种。木23的气孔长度为20.23 μm，是14个枣树品种中气孔长度最长的品种。14个枣树品种气孔长度的变异系数都在0.10以上，Z21枣树气孔长度变异系数最小为0.11，长圆酸枣变异系数最大为0.20。 14个枣树品种气孔宽度在11.20～16.37 μm。其中木23气孔最宽为16.37 μm，大圆酸枣气孔宽度最小为11.20 μm。14个枣树品种中京枣、大圆酸枣的气孔宽度在10～12 μm之间，属于气孔宽度较小的品种。Z21、狗头枣、晋枣、晋枣单倍体、木18、木变、长圆酸枣的气孔宽度在12～14 μm，属于气孔宽度中等的品种。大木枣、木4 n、木枣、木Q2的氣孔宽度在14～16 μm之间，属于气孔宽度较大的品种。木23的气孔宽度为16.37 μm，是14个枣树品种中气孔宽度最宽的品种。14个枣树品种气孔宽度的变异系数中，除了木叶、Z21和木18的变异系数在0.09，其余都在0.10以上，在14个枣树品种中气孔宽度变异系数最大的是长圆酸枣，它的变异系数为0.19。
3 结论与讨论
（1）组培苗叶片和大田苗叶片相比，比较幼嫩，所以在黏取时要轻拿轻放。具体做法是将透明胶布撕开的一端先用解剖针水平固定在实验台上，然后将组培苗叶片上表皮放在胶布上，再反折过来，将下表皮压实，用力将胶布撕开就能获得较好的下表皮黏取效果。经过染色后，整体贴在载玻片上观察。与段云峰等[3]提供的方法（用普通塑料透明胶带黏贴植物叶片下表皮，再刮去叶肉细胞保留叶片表皮观察气孔）比，该方法采用反向黏取，更适合获得幼嫩叶片气孔。
（2）气孔是植物与外界环境进行气体、水分交换的通道， 与其光合作用、呼吸作用和蒸腾作用都有密切的关系[4]。组培枣树气孔见图1。研究枣树的气孔密度、大小及在胁迫条件下气孔的开闭规律对研究其适应性、抗逆性有密切的关系。该研究中14个枣树品种气孔长度在12.27～20.23 μm，气孔宽度在11.20～16.37 μm，气孔密度在41.25～138.60个/mm2。柴慈江等[5]研究了枣树试管苗气孔的开闭规律，这些研究是在炼苗过程进行的。齐向英等[6]研究发现组培木枣、组培狗头枣气孔密度分别为86.34、61.94个/mm2，与该研究结果不同，其原因可能是该研究的材料为继代培养的组培苗，而他们用的材料为大田移栽定植的组培苗。
（3）齐向英[7]、曹娟云[8]等同样用透明胶布黏取法研究了在延川县分布的12个枣树品种和赞皇大枣的气孔。发现12个枣树品种气孔长度在24.64～30.43 μm，气孔宽度在19.83～23.26 μm，气孔数量在66.37～101.60个/mm2，赞皇大枣叶面气孔数量平均值为95.27个/mm2。刘世鹏[9]、黄丽萍[10]的研究表明抗裂品种在气孔密度、气孔大小、气孔开度3个方面的平均值均大于易裂品种。在该研究中，长圆酸枣的枣树气孔密度显著大于其余几个品种，但气孔长度明显小于其他品种，该品种是否具有较强的抗性，还需要进一步的研究。
参考文献
[1]曲泽洲，王永蕙.中国果树志：枣卷[M].北京：中国林业出版社，1993.
[2] 马丁.气孔[M].张崇浩，译.北京：科学出版社，1987：1-73.
[3] 段云峰，王幼宁，李霞.一种获得叶片表皮观察气孔的简易方法及其应用[J].华北农学报，2008，23（S1）：73-76.
[4] SUN Z R，WANG M Y，ZHANG H G，et al.Comparison of stomatal characteristics between Dendrobium loddigesii and Dendrobium candidum[J].Agricultural Science& Technology， 2011， 12（8）：1161-1165.
[5] 柴慈江，张磊，杨恩芹.枣试管苗气孔开闭状况观察[J].天津农业科学，1996，123（2）：5-6.
[6] 齐向英，陈宗礼，张向前，等.三种组培枣树气孔研究初报[J].福建林业科技，2006，33（3）：158-160.
[7] 齐向英，齐龙，赵鹏飞，等.12个枣树品种叶片气孔性状研究[J].江苏农业科学，2009（3）：199-200.
[8] 曹娟云，周茂林，丁媛媛，等.赞皇大枣气孔和叶绿素含量初探[J].江苏农业科学，2011，39（6）：330-331.
[9] 刘世鹏，曹娟云，陈宗礼，等.5个抗裂枣树品种气孔性状研究[J].福建林业科技，2011，38（3）：85-87.
[10] 黄丽萍，刘和，陈晓东，等.裂果性不同枣品种叶片气孔特性观察[J].山西林业科技，2004（4）：8-12.