【摘 要】
：
目的采用原核表达系统,表达人突变型471TNF-α蛋白,并检测其生物学活性.方法采用PCR技术扩增突变型471TNF-α及野生型TNF-α cDNA片段,克隆入中间载体pUCm-T中,并测序证实.以
【机 构】
：
西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室,西安,710061
论文部分内容阅读
目的采用原核表达系统,表达人突变型471TNF-α蛋白,并检测其生物学活性.方法采用PCR技术扩增突变型471TNF-α及野生型TNF-α cDNA片段,克隆入中间载体pUCm-T中,并测序证实.以限制性内切酶切下目的片段,克隆入pBV220中,转入大肠杆菌DH5α,温度诱导表达野生型及突变型471TNF-α蛋白.初步纯化蛋白后,采用MTT法评估两者对L929细胞的杀伤作用.结果①获得了测序正确的野生型TNF-α及突变型471TNF-α的cDNA克隆;②构建了正常人野生型TNF-α及突变型471TNF-α重组表达质粒;③经温度诱导,TNF-α及突变型471TNF-α蛋白均获得了表达;④初步的生物学活性研究表明,突变型471TNF-α蛋白的杀伤作用显著高于野生型.结论突变型471TNF-α的生物学活性优于野生型TNF-α,为进一步开展TNF-α的基础及临床研究奠定了基础.
其他文献
目的 研究男性非淋菌性尿道炎(NGU)患者中阴道毛滴虫感染的状况;评价尿液及尿道拭子聚合酶链反应(PCR)检测阴道毛滴虫感染的敏感性和特异性,建立一种非侵入性检测男性阴道毛滴虫感染的方法。方法 共收集105例患者。每例取2份尿道拭子标本,分别进行InPouchTV培养和PCR检测;取1份尿液标本进行PCR检测。以培养法为“金标准”,将两种PCR法与之比较,分别计算其敏感性、特异性、阳性预测值和阴性
目的研究人重组生长激素(hr-GH)对实验动物猪的强心作用.方法利用起搏器快速(220～240 次/min)起搏心脏1 w造成猪充血性心力衰竭模型.将其分为心衰生长激素组、心衰生理盐水组,
目的调查转入野生型p16cDNA对肝细胞性肝癌细胞生物学行为的影响.方法构建p16基因的逆转录病毒表达载体pCLXSN-p16,完成病毒包装后,分别感染p16表达阴性与阳性的肝癌细胞株,并筛选出各自稳定表达株,观测转基因后外源P16蛋白的表达及肿瘤细胞的生长情况,并检测肿瘤细胞的凋亡与生长周期.结果我们包装产生的pCLXSN-p16假病毒具有感染肿瘤细胞并表达外源P16蛋白的功能,p16表达阴性的
目的评价影响2型糖尿病患者尿铜蓝蛋白(Cp)及尿白蛋白(Alb)的因素.方法记录及测定1046例2型糖尿病患者的年龄、性别、糖尿病病程、血压、腰围、臀围、腰臀比、身高、体重、体重指数、空腹血糖、HbA1c、空腹胰岛素、尿素氮、肌酐(Cr)、尿酸、血脂、血Alb,并留取晨尿测定Cp、Alb及Cr,对尿Alb/Cr、尿Cp/Cr与以上因素行多元线性回归分析.部分患者分入控制血糖组、控制血压组或对照组,
目的 应用免疫组织化学技术观察免疫反应性肾上腺髓质素（ir-ADM）在人正常肾上腺、良恶性肾上腺肿瘤及肾上腺皮质增生组织中的分布特点。方法 对人正常肾上腺皮质（n=10）和髓质（n=10）、嗜铬细胞瘤（n=31）、原发性醛固酮增多症的肾上腺皮质腺瘤（n=13）和增生（n=9）、皮质醇增多症的肾上腺皮质腺瘤（n=12）、增生（n=10）和腺癌（n=4）、无功能肾上腺皮质腺癌组织（n=7）进行ir-A
目的 观察国产盐酸匹格列酮片单用及与磺脲类药物合用治疗 2型糖尿病患者的临床疗效及安全性。方法 117例 2型糖尿病患者分为单用匹格列酮组 (PIO- mono)和匹格列酮加磺脲
目的:分析抑制素(Inhibin)和激活素(Activin)在卵巢癌上皮和间质中的表达,评估两种多肽信号对卵巢癌生长的调控作用,探讨卵巢癌发病机制.方法:采用免疫组化法检测102例卵巢癌
目的研究新决明内脂与细胞内脂质代谢有关的生物学效应及分子机理.方法首先用动物实验检查该化合物的生物学效应.再用细胞学方法研究该化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用.
5月27日,由《钓鱼》杂志主办,河南温县体育局、河南省钓鱼协会承办,河南温县金色田野垂钓中心协办,深圳钓鱼郎渔具设计有限公司特别支持的第三届《钓鱼》杂志“读者杯”全国
六、饵料状态问题在垂钓中,饵料状态对鱼口有着重要的作用,尤其是钓精养池的鱼,既要追求好的雾化效果,又要讲究所配制饵料的持钩能力。雾化太快,持钩性就差,易引起鱼层上移,