【摘 要】
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目的 探讨琥珀酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响及其调控机制.方法 用琥珀酸类似物琥珀酸二乙酯(DS)处理HUVEC 24 h,比色法检测细胞内琥珀酸含量,Western blot检测细胞
【机 构】
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南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地,湖南省衡阳市421001
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目的 探讨琥珀酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响及其调控机制.方法 用琥珀酸类似物琥珀酸二乙酯(DS)处理HUVEC 24 h,比色法检测细胞内琥珀酸含量,Western blot检测细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素DN端(GSDMD-N)的含量;ATP测定试剂盒以及活性氧(ROS)荧光探针分别检测琥珀酸对HUVEC的ATP以及ROS生成的影响.ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)检测ROS在琥珀酸诱导HUVEC焦亡中的作用.琥珀酸氧化抑制剂丙二酸二甲酯(DMM)检测琥珀酸氧化代谢对ROS产生的影响.结果 DS促HUVEC内琥珀酸蓄积,上调焦亡相关蛋白Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N和NLRP3的表达,抑制ATP生成并上调ROS产生.NAC抑制琥珀酸诱导的ROS生成,并下调上述焦亡相关蛋白的表达.DMM下调琥珀酸诱导的ROS产生以及HUVEC的焦亡.结论 琥珀酸通过氧化代谢上调ROS生成,进而促进HUVEC焦亡.
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