【摘 要】
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抗菌肽是一类具有多种生理活性,具备新型抗菌机制的多肽,是替代传统抗生素,成为新一代治疗药物的理想选择。本研究人工合成棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D成熟区基因片段,双酶切原核
【机 构】
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浙江师范大学野生动物保护与利用技术中心野生动物生物技术与保护利用浙江省重点实验室,浙江师范大学行知学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(31772482,31472015),浙江省自然科学基金重点项目(LZ17C030001),浙江省省院合作林业科技项目(2016SY12),金华市科技计划项目(2013-2-1008).
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抗菌肽是一类具有多种生理活性,具备新型抗菌机制的多肽,是替代传统抗生素,成为新一代治疗药物的理想选择。本研究人工合成棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D成熟区基因片段,双酶切原核表达载体pET-32a(+)后回收线性化载体,In-Fusion克隆技术构建重组质粒后转化至E.ColiDH5α感受态细胞,筛选阳性单菌落进行菌液PCR鉴定和测序,转化pET-32a(+)-Spinosan-D至BMBL21(DE3)pLysS菌株。通过优化诱导表达的时间、温度和异丙基株-β-D-硫代吡喃半半乳糖苷(IPTG)终浓度,
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