论文部分内容阅读
目的：外毒素A（ toxA基因编码）是铜绿假单胞菌毒力最强的因子之一，PcrV（ pcrV基因编码）是铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统的关键调控因子之一。文中旨在构建重组toxA和pcrV基因的铜绿假单胞菌核酸疫苗，并在HEK-293细胞中表达目的蛋白。方法 PCR法从铜绿假单胞菌基因组基因中扩增出 toxA和pcrV基因，点突变法对toxA基因进行减毒优化，随后将突变的toxAm基因和pcrV基因分别插入pIRES真核表达质粒的2个多克隆位点，构建真核双表达重组质粒pIRES-toxAm-pcrV。脂质体法将p