【摘 要】
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目的：构建alpha珠蛋白基因片段反义表达载体，抑制重型beta地贫患者alpha珠蛋白基因的过量表达，为重型beta地贫基因治疗打下基础。方法：采用PCR扩增alpha珠蛋白基因片段807bp，反应
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目的：构建alpha珠蛋白基因片段反义表达载体，抑制重型beta地贫患者alpha珠蛋白基因的过量表达，为重型beta地贫基因治疗打下基础。方法：采用PCR扩增alpha珠蛋白基因片段807bp，反应条件94℃ 30s,68℃ 1min,72℃ 2min,35个循环，然后将所扩增片段用Klenow大片段酶补平PCR产物末端，另外用HindⅢ酶切pLNSX,用Klenow补平后，与补平末段的PCR产物平端连接，转化用CaCl2制备的感受态细胞受体DH5α，用碱法提取所得克隆子质粒，电泳比较质粒大小，再用P
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