改良法构建Ⅱ型重组腺相关病毒介导人TIMP1基因及鉴定

来源 :中国普外基础与临床杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：SRoo09

【摘要】

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目的改良法构建携带金属蛋白酶抑制剂1（TIMP1）基因的Ⅱ型重组腺相关病毒（rAAV2）。方法采用PCR法从pDNR-LIB质粒中扩增人全长TIMP1基因，利用基因重组的方法将TIMP1全长cDNA插入通用

【作者】

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李明皓吴小兵严律南

【机构】

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宁夏医学院附属医院肝胆外科,中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室,四川大学华西医院普外科

【出处】

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中国普外基础与临床杂志

【发表日期】

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2008年12期

【关键词】

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目的改良法构建携带金属蛋白酶抑制剂1（TIMP1）基因的Ⅱ型重组腺相关病毒（rAAV2）。方法采用PCR法从pDNR-LIB质粒中扩增人全长TIMP1基因，利用基因重组的方法将TIMP1全长cDNA插入通用型AAV2载体质粒pSNAV的多克隆位点，构建成pSNAV-TIMP1；用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中，G418细胞筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK21／rAAV2-TIMP1；用具有rAAV2包装功能的重组Ⅰ型单纯疱疹病毒（rHSV1-rc／△UL2）感染BHK-

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