【摘 要】
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该研究旨在探究高糖抑制骨髓基质细胞(bone marrow stroma cells,BMSCs)成骨分化的作用及其可能的机制.采用25.5 mmol/L的葡萄糖(HG)模拟高糖微环境,通过碱性磷酸酶(ALP)染色及生化定量检测成骨分化水平,qRT-PCR检测成骨分化相关基因rnRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖活性,荧光探针H2DCFDA检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,脂质过氧化氢荧光探针Liperfluo检测脂质过氧化产物(lipid peroxida
【机 构】
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重庆医科大学附属永川医院,重庆402177
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该研究旨在探究高糖抑制骨髓基质细胞(bone marrow stroma cells,BMSCs)成骨分化的作用及其可能的机制.采用25.5 mmol/L的葡萄糖(HG)模拟高糖微环境,通过碱性磷酸酶(ALP)染色及生化定量检测成骨分化水平,qRT-PCR检测成骨分化相关基因rnRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖活性,荧光探针H2DCFDA检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,脂质过氧化氢荧光探针Liperfluo检测脂质过氧化产物(lipid peroxidation products,LPO)水平,流式细胞仪定量检测平均荧光强度,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达水平,透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)观察线粒体超微结构.结果 显示,高糖(HG)显著抑制BMSCs成骨分化及细胞增殖活性,导致细胞内ROS及LPO水平显著升高,而铁死亡抑制剂可以恢复BMSCs成骨分化及细胞增殖活性,降低ROS及LPO水平,除此以外高糖(HG)导致BMSCs线粒体皱缩、体积变小、膜密度增高、嵴减少、细胞核形态变化不明显等铁死亡样改变.综上所述,高糖通过诱导铁死亡从而抑制BMSCs成骨分化功能.
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该研究旨在探讨ROR1-AS1对神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制.收集67例神经母细胞瘤组织和瘤旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测组织中ROR1-AS1和miR-758-3p的表达情况.转染ROR1-AS1小干扰RNA、miR-758-3p模拟物或共转染ROR1-AS1小干扰RNA与miR-758-3p抑制剂至SK-N-SH细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测C
为了探讨CircRNA ANKRD36对脓毒症血管内皮细胞凋亡和氧化应激的影响及可能机制,该研究将CircRNA ANKRD36小干扰RNA、miR-127-5p模拟物或CircRNA ANKRD36小干扰RNA和miR-127-51抑制剂转染至人脐静脉血管内皮细胞中,然后用1.0 μg/mL LPS干预转染后的细胞24 h,RT-qPCR法检测细胞中CircRNA ANKRD36和miR-127-5p的表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测细胞中Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平,
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该研究探讨了电刺激对诱导多能干细胞的心脏分化影响,并评估了分化心肌细胞对心肌梗死的治疗效果.电刺激和非电刺激促进诱导多能干细胞分化出功能性心肌细胞;qRT-PCR和细胞免疫荧光检测分化心肌细胞中心源性基因和功能成熟基因表达情况;建立心肌梗死模型SD大鼠并将其随机分为心肌梗死组、电刺激组和对照组,每组10只.心肌梗死组只结扎冠状动脉,电刺激组和对照组分别在心肌梗死边界注射电刺激和无电刺激预处理的分化心肌细胞.超声心动图和有创血流动力学检测心功能;Masson染色评估梗死面积,免疫组化检测梗死边缘区毛细血管密
为探讨circTLK1对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响及分子机制,该研究将人肾小球系膜细胞HMCL分为对照(Con)组、高糖(HG)组、HG+si-NC组、HG+si-circTLK1组、HG+miR-NC组、HG+miR-374a-5p组、HG+si-circTLK1 +anti-miR-NC组、HG+si-circTLK1 +anti-miR-374a-5p组.采用RT-qPCR检测circTLK1和miR-374a-5p的表达水平;ELISA检测TNF-α、IL-6水平;MTT检测细胞增殖活性;
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同源盒(homeobox,HOX)基因家族由包含同源盒结构域(homeodomain)的转录因子组成,其表达失调与多种癌症的发生发展有关.HOXC8作为HOX家族成员之一,它的表达可促进乳腺癌细胞的增殖与转移等.为进一步探索HOXC8在乳腺癌中的作用机制,通过转录组测序、West-em blot和实时荧光定量PCR等实验发现,在乳腺癌细胞中HOXC8可上调生长分化因子15(GDF15)的表达.通过染色质免疫沉淀及荧光素酶报告等实验,证明了HOXC8可结合到GDF15基因的启动子上,作为转录因子来激活GDF
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