观察第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)抑制剂牛细小病毒bpV(pic)对神经干细胞(NSCs)增殖及分化的影响。
方法取胚胎16 d SD大鼠的大脑皮层，制成干细胞悬液，细胞分组为：A组(对照组)：不做任何处理；B组(实验组)：bpV处理组(培养液中含bpV)。于第5天用免疫荧光染色观察两组干细胞球的数量，行细胞计数试剂盒(CCK-8)试验检测NSCs增殖，免疫荧光染色检测NSCs分化，反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组细胞在第5天时PTEN和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的表达。
结果实验组的每个低倍视野(×50)干细胞数量为60±5，明显多于对照组(40±3，P<0.01)。CCK-8试验证实实验组在425 nm处的吸光度值为0.997±0.085，高于对照组(0.788±0.083，P<0.01)。实验组NSCs分化为神经元的百分率为(27.860±1.927)%，明显多于对照组[(13.120±1.130)%，P<0.01]；而分化为胶质细胞的百分率为(61.900±1.840)%，明显少于对照组[(77.520±1.035)%，P<0.01]；分化为少突胶质细胞的百分率实验组为(5.320±0.975)%，对照组为(4.460±0.586)%(P<0.05)；分化为其他细胞的百分率实验组为(4.780±0.572)%，对照组为(4.900±1.208)%(P>0.05)。实验组NSCs中PTEN的表达量是照组NSCs中PTEN表达量的2.13倍(P<0.01)，而实验组NSCs中mTOR的表达量是照组NSCs中mTOR表达量的3.62倍(P<0.01)。
结论PTEN抑制剂bpV(pic)可促进神经干细胞增殖，并在一定程度上促进神经干细胞向神经元分化。