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针对显微图像测量系统的特点,提出了一种结合标准显微标尺的标定方法.该方法首先获取己知尺寸的显微标尺图像,接着通过预处理及边缘检测分离出图像中的标尺刻度线,然后基于Hough识别出长刻度线,并计算刻度线对应的像素距离,从而计算出标定系数.标定过程中釆用了现有的显微刻度尺,使用方便.实验结果表明,该方法标定精度较高.