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目的构建PEDF基因腺病毒表达载体,为基因治疗年龄相关性黄斑变性(AMD)奠定基础。方法从大鼠视网膜组织中提取总RNA,RT—PCR扩增PEDF基因cDNA,并将回收的PEDF基因克隆人质粒pGEM—Teasy载体中,亚克隆人腺病毒表达载体质粒pDC316中,DNA序列分析加以证实。利用腺病毒Admax系统,通过含有目的基因片段PEDF的穿梭载体pDC316/PEDF和病毒骨架质粒共转染293细胞的方法包装出重组腺病毒AdPEDF。Western Blot对重组腺病毒进行鉴定。结果基因测序表明PEDF基因