小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养

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目的建立小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养方法 ,并诱导其成肌分化,检测成肌分化过程中微小RNA-1(miRNA-1)和miRNA-155表达情况。方法提取新生小鼠后腿肌肉,经胶原酶消化,利用细胞贴壁差异性分离及纯化原代成肌细胞。使用含马血清的分化培养基诱导其成肌分化,通过肌球蛋白重链抗体——MF20免疫荧光染色鉴定成肌能力。使用Taqman实时定量聚合酶链反应检测原代成肌细胞分化过程中miRNA-1和miRNA-155表达情况。结果成功分离并纯化小鼠原代成肌细胞;成功诱导原代成肌细胞向骨骼肌分化,MF20
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