【摘 要】
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将重组逆转录病毒融合蛋白表达载体RCASBP-GFP-SMARCE1包装为病毒颗粒,并测定其病毒滴度.利用脂质体转染法在DF-1细胞系中转染重组质粒,收集上清液,超速离心浓缩病毒,用GFP标
【机 构】
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武汉市畜牧兽医科学研究所,武汉,430208武汉市畜牧科技推广站,武汉,430012;华中农业大学动物科技学院,武汉,430070;
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将重组逆转录病毒融合蛋白表达载体RCASBP-GFP-SMARCE1包装为病毒颗粒,并测定其病毒滴度.利用脂质体转染法在DF-1细胞系中转染重组质粒,收集上清液,超速离心浓缩病毒,用GFP标记法测定病毒滴度.结果显示,转染后3～4 d可见少许GFP阳性细胞的出现,6～7 d后所有细胞均有GFP的表达,11d左右细胞达到超汇合状态,开始收集上清液;GFP标记法测定超速离心后的病毒滴度为5×1010IU/mL.结果表明,成功制备了高滴度的重组逆转录病毒颗粒,为下一步在胚胎中进行相关基因的功能研究奠定了基础.
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