【摘 要】
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目的观察促红细胞生成素(EPO)处理对棕榈酸(PA)诱导HepG2细胞糖异生及糖原合成的影响及作用机制。方法250 μmol/L的PA作用HepG2细胞24 h，分别用5、10 U/ml EPO作用24 h，另外，EPO处理的HepG2细胞分别加入磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002或渥曼青霉素(wortmannin)预孵育1 h。比色法检测HepG2细胞糖原含量，Wester
【机 构】
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223300 南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科,南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科,南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科,南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科,南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科,南京
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目的观察促红细胞生成素(EPO)处理对棕榈酸(PA)诱导HepG2细胞糖异生及糖原合成的影响及作用机制。
方法250 μmol/L的PA作用HepG2细胞24 h，分别用5、10 U/ml EPO作用24 h，另外，EPO处理的HepG2细胞分别加入磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002或渥曼青霉素(wortmannin)预孵育1 h。比色法检测HepG2细胞糖原含量，Western blotting检测磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、PI3K蛋白表达、蛋白激酶B(AKT)、叉头状转录因子O1(FOXO1)、糖原合酶激酶3β (GSK-3β)表达。多组间比较采用方差分析。
结果与PA处理组相比，5 U/ml和10 U/ml EPO处理组细胞下游分子GSK-3β(分别为1.02±0.03比0.74±0.11、1.06±0.02比0.74±0.11，t=4.236、4.996，均P<0.05)及FOXO1磷酸化水平明显增强(分别为0.99±0.05比0.73±0.09、1.13±0.06比0.73±0.09，t= 4.798、6.757，均P<0.05)。与EPO治疗组比较，加入抑制剂LY294002或wortmannin后，GSK-3β(0.68±0.09比1.12±0.14、0.76±0.10比1.12±0.14，t=-4.632、-3.655，均P<0.05)及FOXO1(0.92±0.02比1.15±0.06、0.72±0.07比1.15±0.06，t=-6.532、-7.984，均P<0.05)磷酸化水平均明显被抑制。
结论在PA诱导的HepG2细胞，EPO可能通过PI3K/AKT介导的FOXO1、GSK-3β通路改善糖代谢。
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