毛果杨漆酶基因PtrLAC-2的原核表达与多克隆抗体制备研究

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目的:克隆毛果杨漆酶基因PtrLAC-2,并对其进行原核表达,同时制备高特异性、高效价的PtrLAC-2多克隆抗体,为研究漆酶基因蛋白在体外结构与功能奠定基础。方法:利用拟南芥中的漆酶基因序列对毛果杨基因组数据库进行同源检索,PCR同源克隆并扩增得到毛果杨PtrLAC-2基因序列,将其亚克隆到pET30a(+)载体得到PtrLAC-2-pET30a(+)原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达并纯化得到PtrLAC-2重组蛋白。采用皮下免疫法将纯化的PtrLAC-2蛋白免疫兔子制备多克隆抗
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