【摘 要】
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目的 研究人中性粒细胞吞噬申克孢子丝菌酵母相和白念珠菌后胞内活性氧簇(ROS)的实时表达水平及对两者杀菌能力的差异.方法 应用密度梯度离心法分离人外周血中性粒细胞,并通过ROS探针(DCFH-DA)、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测申克孢子丝菌酵母相临床株和白念珠菌标准株ATCC90028作用后,中性粒细胞内ROS的实时表达水平及对上述2种真菌孢子的杀菌率.结果 申克孢子丝菌酵母相临床株和白念珠菌
【机 构】
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430022武汉市第一医院皮肤科/湖北省感染性皮肤病医学临床研究中心,430022武汉市第一医院皮肤科/湖北省感染性皮肤病医学临床研究中心,武汉大学医学研究中心,430022武汉市第一医院皮肤科/湖北
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目的 研究人中性粒细胞吞噬申克孢子丝菌酵母相和白念珠菌后胞内活性氧簇(ROS)的实时表达水平及对两者杀菌能力的差异.方法 应用密度梯度离心法分离人外周血中性粒细胞,并通过ROS探针(DCFH-DA)、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测申克孢子丝菌酵母相临床株和白念珠菌标准株ATCC90028作用后,中性粒细胞内ROS的实时表达水平及对上述2种真菌孢子的杀菌率.结果 申克孢子丝菌酵母相临床株和白念珠菌标准株ATCC 90028作用中性粒细胞60 min后,申克孢子丝菌组中性粒细胞内ROS表达水平达到峰值(平均荧光强度159.67±11.34),并显著高于白念珠菌组(112.22±9.66),经LSD-t检验,P＜ 0.01;而作用120～180 min后,胞内ROS表达水平(120 min为89.01±9.81;180 min为57.63±8.46)迅速下降,显著低于白念珠菌组中ROS的同期表达水平(120 min时为110.25±7.28; 180 min时为109.98±9.00,经LSD-t检验,120 min时P＜0.05,180 min时P＜0.01).激光共聚焦显微镜观察到,ROS主要表达于吞噬上述真菌孢子的中性粒细胞中,并被募集到被吞噬的部分孢子表面.中性粒细胞对申克孢子丝菌180 min杀菌率(19.21％±3.68％)亦显著低于其对白念珠菌孢子的杀菌率(26.63％±4.97％),经LSD-t检验,P＜ 0.01.结论 中性粒细胞吞噬上述2种真菌孢子后,胞内ROS呈明显的差异性表达.与白念珠菌相比,中性粒细胞内ROS水平的迅速下降在一定程度上抑制了其对申克孢子丝菌的杀伤效能。
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