【摘 要】
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目的体外克隆表达并纯化C70rf69重组蛋白，对C70rf69蛋白进行生物信息学分析。方法PCR扩增C70rf69目的基因片段，构建原核表达载体，转化BL21，IPTG诱导目的蛋白表达，SDS—PAGE和Weste
【机 构】
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北京大学地坛医院教学医院,首都医科大学附属北京地坛医院感染中心,首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所,新发突发传染病研究北京市重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81071411;81271901);国家重大专项艾滋病和病毒性肝炎2012~2015年(2012ZX10005010)
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目的体外克隆表达并纯化C70rf69重组蛋白，对C70rf69蛋白进行生物信息学分析。方法PCR扩增C70rf69目的基因片段，构建原核表达载体，转化BL21，IPTG诱导目的蛋白表达，SDS—PAGE和Westernblot鉴定，Ni-NTA纯化目的蛋白。结果扩增获得序列完全正确的C70rf69基因片段（自然变异体），重组蛋白以包涵体的形式高效表达，在非变性条件下获得较高纯度的重组蛋白。生物信息学软件预测C70rf69蛋白（含信号肽）含有PKC、CK2磷酸化位点和N-十四烷基化位点。结论成功的对分泌蛋白
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