体外诱导羊膜上皮细胞转分化为雌性生殖细胞的实验研究

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目的 通过建立体外分离和培养人羊膜上细胞的方法,针对体外诱导羊膜上皮细胞向次性生殖细胞转分化的潜能进行了分析。方法 经体外分离、培养处理的hAECs,以添加5%的人卵泡液的培养基为诱导剂,针对其细胞形态改变在倒置显微镜下观察,并对培养基中雌二醇(E2)含量使用化学发光免疫技术进行检测,并针对次性生殖细胞相关基因及蛋白表达水平变化使用实时荧光定量PCR等方法完成测量。结果 体外培养的hAECs且具有上皮细胞特有的外观,能够完成特异性细胞角蛋白的表达和胚胎干细胞特性转录因子POU5f1和Otc4的表达。通过对E2含量的测定显示,对照组中并无E2生成,诱导组中有E2生成,于诱导的第8d开始增加,至第10d达到峰值,随后逐步下降。诱导组生殖细胞GDF9和DAZL的mRNA表达水平相对于对照组明显较高,P0.05。结论 人卵泡液能够有效的实现体外诱导hASCs向雌性生殖细胞的转分化。
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