【摘 要】
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目的通过构建多拷贝数表达质粒，获得高表达乙型肝炎表面抗原（HBsAs）的毕赤酵母（Pichia pastoris）菌株。方法通过对单拷贝表达质粒进行改造，将表达盒（5’AOX-HBsAg-TT）重复导入载体，构
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目的通过构建多拷贝数表达质粒，获得高表达乙型肝炎表面抗原（HBsAs）的毕赤酵母（Pichia pastoris）菌株。方法通过对单拷贝表达质粒进行改造，将表达盒（5’AOX-HBsAg-TT）重复导入载体，构建多拷贝数表达质粒。通过电转化、15L规模发酵和纯化，获得纯化HBsAg颗粒，并对表达产物的特异性、免疫原性及表达量与拷贝数间的关系进行分析。结果多拷贝数重组毕赤酵母的表达产物经ELISA、SDS-PAGE、Western blot检测，显示出良好的特异性，电镜观察证明表达产物能够自发装配成22nm
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