【摘 要】
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目的研制抗腺病毒载体(Adv)表面蛋白的单克隆抗体(McAb)。方法将Adv以Al(OH)3佐剂化,常规免疫BALB/c小鼠。采用细胞融合技术制备抗Adv McAb;采用ELISA、免疫细胞化学及Wester
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心,武汉生物制品研究所
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目的研制抗腺病毒载体(Adv)表面蛋白的单克隆抗体(McAb)。方法将Adv以Al(OH)3佐剂化,常规免疫BALB/c小鼠。采用细胞融合技术制备抗Adv McAb;采用ELISA、免疫细胞化学及Western blot法对McAb进行筛选与鉴定。结果共获得6株可稳定分泌特异性McAb的细胞(A4H11、A8C7、F1H5、G1D2、G4E3、H2G8),其染色体数目为102~106条,所分泌McAb均属IgG1亚类,持续3个月适应培养仍能保持其稳定的抗体分泌能力。腹水抗体的ELISA效价在1∶106~1∶108之间;Western blot结果显示6株McAb均与来自腺病毒载体及野生3、5、7型腺病毒抗原提取物中分子量约为114 kD的多肽反应,据此推测它们均是抗ADV-TK六邻体蛋白的McAb。结论成功制备出6株抗腺病毒载体六邻体单克隆抗体,为腺病毒载体应用于肿瘤基因治疗的临床前研究提供物质基础。
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