粘膜佐剂霍乱毒素B亚单位的克隆与表达

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目的:构建表达粘膜佐剂霍乱毒素 B亚单位( CTB)基因的重组质粒,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白.方法:用 PCR方法从霍乱弧菌中扩增 CTB片段 ,将其转入原核载体质粒 pET- 32a(+),在大肠杆菌 Top10克隆,并在 BL21中表达.结果:重组质粒 PET- CTB的全长序列经分析与基因文库公布的一致;表达蛋白经 SDS- PAGE分析,相对分子量与文献相符;重组蛋白竟 Western blot检测有抗原性.结论:基因重组菌表达的 CTB蛋白可能作为有效、安全的粘膜佐剂用于口服疫苗的研制
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