球茎海棠的叶片培养与快速繁殖

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植物名称球茎海棠(Begonia tuberhybri-da)。2 材料类别叶片。3 培养条件以MS培养基为基本培养基。不定芽诱导与增殖培养基附加:(1)6-BA 3 mg·L-1(单位下同);(2)6-BA 1+IAA 0.1。愈伤组织与不定芽诱导培养基附加:(3)6-BA 3+NAA 1;(4)6-BA 1+NAA 3;(5)6-BA3+NAA 3。生根培养基附加:(6)NAA 0.1;(7)NAA 1。上述培养基均加0.8%琼脂和3%蔗糖,pH 5.8。培养温度(23±2)℃,每天光照12 h,光照度1 200 lx。4 生长与分化情况4.1 无菌材料的获得从开花期的球茎海棠植株上切取较幼嫩的叶片,用自来水冲洗干净,在70%的乙醇中快速浸泡1~3 s,转到0.1%的氯化汞中灭菌10 min,再用无菌水冲洗3~4次,滤纸吸干,接种到预先准备好的培养基上。4.2 不定芽诱导和增殖将叶片接种在培养基(1)和(2)上。3周后,切成长度为1~1.5 cm的方块,分别转接到培养基(2)上。从第3周开始,培养基(2)上的外植体表面及周边直接分化出密集的单芽,每个外植体平均21个,分化率达100%。如果培养基(1)上的叶片不转接,也可在叶片的正面出现刺状的不定芽。rn4.3 愈伤组织诱导和不定芽分化当培养基(1)、(2)上的外植体转接在培养基(3)、(4)、(5)上后,外植体表面和周边出现浅绿色突起和致密的愈伤组织,继而分化出芽,分化率在78%~95%。4.4 不定芽的增殖将愈伤组织上分化的不定芽和外植体周围直接分化的丛生芽切离,再转接到培养基(2)上,就可实现不定芽的增殖。1个切块上能增殖数10个不等的小芽。增殖到一定数目后即可转接到生根培养基上培养。4.5 生根与移栽待增殖芽长到一定大小时,转到培养基(6)和(7)上,3周后芽基部长出多条辐射状小根,生根率达到95%。我们还做了加大NAA浓度的比较,结果生根率明显提高,但是茎叶的生长严重被抑制。选择不同处理条件下生根的植株移栽。移植之前,先打开瓶盖,炼苗2~3 d,取出小苗仔细洗去根上附着的琼脂,移入拌有蛭石的土中,成活率达到90%左右。5 意义与进展球茎海属秋海棠科秋海棠属,是重要的花卉植物。其花大而鲜艳,观赏价值高。在盆栽条件下一般用球根繁殖,但较其它海棠困难,且繁殖系数很低。利用组织培养方法繁殖,可以提高繁殖系数,因而具有很大的应用潜力。
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