猪繁殖与呼吸综合征病毒M+N基因重组腺病毒载体的构建

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本研究构建了M+N基因的重组腺病毒载体。首先用反转录聚合酶链反应(RT—PCR)的方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因,将两者用口蹄疫病毒2A序列串联起来,将连接好的M+N基因插入腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV,经筛选获得了重组质粒pAdTrack—CMV/M+N;然后在大肠杆菌BJ5183内将此重组质粒和腺病毒骨架载体pAdEasy-1进行同源重组,获得了插有外源基因的重组腺病毒质粒pAd/M+N;最后,经PacI酶切线性化后转染HEK一293细胞,成功获得含有M+N基因的重组腺病
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