荧光恒温扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立与评价

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目的:利用荧光恒温扩增(SAT)技术建立一种快速可靠的肠道病毒71型(EV71)检测方法。方法通过设计特异性的 EV71 RNA 扩增引物及优化探针技术,使用 M-MLV 反转录酶及 T7 RNA 多聚酶对 EV71 RNA进行核酸扩增,同时利用荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪进行实时的荧光信号收集和检测。检测复旦大学附属儿科医院儿童手足口病患儿粪便样本199例,以 EV71型核酸检测试剂盒作参比方法,DNA 测序为第三方验证方法,对研究数据进行 Kappa 一致性分析。结果SAT 技术共检测到119例
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