【摘 要】
：
[目的]以香榧Torreya grandis?\'Merrillii\'幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系.[方法]以香榧种子突破种鳞后第8周至第11周的幼胚作为转基因受体材料,比较受体胚龄、农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗生素质量浓度对遗传转化效率的影响,并采用潮霉素、绿色荧光蛋白GFP表达及GFP基因聚合酶链式反应对遗传转化香榧幼胚培养物进行阳性筛选.[结果]随着胚龄
【机 构】
：
浙江农林大学 林业与生物技术学院,浙江 杭州 311300;浙江农林大学 省部共建亚热带森林培育国家重点实验室,浙江 杭州 311300
论文部分内容阅读
[目的]以香榧Torreya grandis?\'Merrillii\'幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系.[方法]以香榧种子突破种鳞后第8周至第11周的幼胚作为转基因受体材料,比较受体胚龄、农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗生素质量浓度对遗传转化效率的影响,并采用潮霉素、绿色荧光蛋白GFP表达及GFP基因聚合酶链式反应对遗传转化香榧幼胚培养物进行阳性筛选.[结果]随着胚龄的增加,香榧幼胚抗逆性增强,污染率降低,成活率提高,第10周和第11周幼胚成活率分别为52.1％和52.3％.农杆菌菌液浓度和侵染时间均对香榧幼胚的污染率、成活率、愈伤组织诱导率以及体胚发生率具有显著影响(P<0.05).菌液吸光度[D(600)]为0.5时,香榧幼胚愈伤组织诱导率和体胚发生率最高,分别为17.9％和17.3％;侵染时间为10?min时,愈伤组织诱导率和体胚发生率为最高,分别达17.5％和17.1％.羧苄青霉素对于受体材料的农杆菌脱除具有显著影响(P<0.05),当羧苄青霉素质量浓度为300?mg·L?1时,成活率、愈伤组织诱导率和体胚发生率均最高,分别为60.5％、15.8％和17.5％.潮霉素对于香榧幼胚培养物的阳性筛选具有良好的效果,当潮霉素质量浓度为100?mg·L?1时,成活率为30.5％.[结论]不同胚龄香榧幼胚遗传转化效果不同,突破种鳞后第10周香榧幼胚遗传转化效果良好;当农杆菌菌液D(600)为0.5,侵染时间为10?min时,转化效果最佳;300?mg·L?1为羧苄青霉素脱除农杆菌的最佳质量浓度;100?mg·L?1是潮霉素阳性香榧幼胚筛选的最佳质量浓度.图3表5参37
其他文献
目的 分析重组人尿激酶原对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后血流灌注的影响.方法 选取148例STEMI患者,均行PCI治疗,对照组冠脉内注射替罗非班;观察组给予重组人尿激酶原+替罗非班,测定两组术后冠脉TIMI血流分级、TIMI心肌灌注分级(TMPG),统计两组无复流发生率;同时测定两组心功能〔左室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)〕、心肌损伤标志物〔肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)I〕水平,比较
目的 分析外周血CD4+淋巴细胞水平与老年获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)伴心律失常患者心电图特征的关系.方法 回顾性分析45例老年艾滋病伴心律失常患者资料作为发生组,并选取同期医院收治的45例老年艾滋病患者资料作为未发生组;所有患者资料完整,包括一般资料、实验室资料等,分析外周血CD4+水平与老年艾滋病患者发生心律失常的关系;并依据外周血CD4+水平将发生组分为低、中、高水平3组,比较3组心电图特征.结果 发生组与未发生组CD4+水平差异有统计学意义(P1,P<0.05);发生组中CD4+低水平23例,中
为了研究卧式自清洗网式过滤器在不同进水流速下过滤和排污过程中内部流场的分布规律,利用Fluent软件对卧式自清洗网式过滤器的过滤和排污过程进行清水流场的数值模拟,得到不同进水流速下的压强场和速度场,并将模拟结果与试验结果对比,二者相对误差在10％以内,证实了数值模拟的可靠性.数值模拟结果表明,进水流速越大,罐体和排污系统内的水流掺混越剧烈,可减少泥沙淤积,有助于提高过滤和排污效果,但随着进水流速的增大,罐体和排污系统的进出口压强差随之增大,其水头损失也增大,对过滤器结构稳定性要求也越高.上述研究结果可为卧
目的 探讨ALDH2基因多态性与海南地区老年2型糖尿病患者冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)易感性的相关性.方法 接受冠脉造影检查的老年2型糖尿病患者300例根据冠脉造影结果分为2型糖尿病合并冠心病组(冠心病组)178例,2型糖尿病未合并冠心病组(非冠心病组)122例;同期接受冠状动脉造影检查排除冠状动脉病变的150例老年非2型糖尿病患者为对照组;采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)进行各组ALDH2基因型的测定,利用Logistic回归模型分析老年2型糖尿病患者发生冠心病的影响因素.结果 与非冠心病
为了探明塑相水田土壤参数、行驶速度对履带式水田拖拉机行驶性能的影响,获得较佳的作业条件,利用多体动力学软件RecurDyn建立了水田土壤力学模型和履带式水田拖拉机物理模型,并以行驶阻力、下陷深度为试验指标,以土壤黏粒含量、含水量、密度以及行驶速度为试验因素,采用四因素五水平二次正交组合方法进行仿真试验.结果表明:行驶阻力与土壤黏粒含量、含水量呈正效应,与土壤密度、行驶速度呈负效应,影响的主次关系为土壤含水量、行驶速度、土壤密度、土壤密度与黏粒含量的交互作用;下陷深度随着土壤含水量增加而增加,随着土壤黏粒含
目的 分析老年Graves病合并甲状腺功能亢进性心脏病(HHD)患者肝功能与心功能的相关性.方法 60例老年Graves病合并HHD患者为A组,同期60例单纯老年Graves病患者为B组,同期60名老年健康体检者为对照组.对3组一般资料及甲状腺、肝功能、心肌酶指标进行比较,对A组心功能分级进行评价.结果 A组或B组血清三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及肝功能指标水平均显著高于对照组,而血清促甲状腺激素(TSH)水平显著低于对照组,A组
[目的]研究不同加工工艺(炒制和烘烤)的香榧Torreya grandis?\'Merrillii\'种仁香气成分、油脂氧化和抗氧化能力的变化,揭示不同加工方式对香榧香气物质和油脂品质形成的影响,探讨香榧的最优烘烤工艺.[方法]比较炒制香榧(传统的炒制方式加工)、烘烤香榧(烘烤方式加工)和原料香榧(未加工前的原料)香气组分的差异,并测定3种香榧材料的酸价、过氧化值、总酚质量分数和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除活性,明确适宜的香榧加工方式;并在此基础上,进一步设计以第1次烘烤时
目的 探讨左室射血分数(LVEF)与心率比值(HrEF)对老年心力衰竭(心衰)患者心功能的评估价值.方法 选取以左心衰为主的老年住院患者532例,治疗前完成心脏超声和心电图检查.HrEF定义为LVEF与相应时间段内心率比值,根据NYHA心功能分级,按LVEF、心率、年龄进行分类统计,分析相应指标在心衰中的评估价值.结果 心功能Ⅰ～Ⅳ级患者LVEF、心率、HrEF组间差异均有统计学意义(P<0.01).射血分数降低心衰、射血分数中间值心衰及射血分数保留心衰与相应HrEF比较,差异均有统计学意义(P<0.01
目的 探究血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2、CD64指数在心力衰竭(简称心衰)合并肺部感染诊断中的价值及与心功能关系.方法 选取92例心衰合并肺部感染患者为感染组,同期92例心衰未合并肺部感染患者为非感染组.测定对比两组血清MMP-9、MIP-2、CD64指数、心功能指标〔左室收缩末期容积指数(LVESDVI)、左室舒张末期容积指数(LVEDVI)、左室射血分数(LVEF)〕水平,应用Pearson相关性分析血清MMP-9、MIP-2、CD64指数与心功能关联性,绘制受试者
[目的]研究香榧Torreya grandis?\'Merrillii\'种实膨大过程中蔗糖及其产生的己糖在假种皮和种仁中积累与分配规律,初步阐明蔗糖变化对香榧种实库活力的影响,深入探讨蔗糖代谢关键酶活性及其基因表达模式对香榧种实膨大的影响.[方法]以香榧种实膨大不同阶段的种仁和假种皮为研究材料,测定蔗糖、葡萄糖、果糖及淀粉质量分数,蔗糖代谢相关酶活性,激素质量分数以及蔗糖代谢相关酶编码基因的表达量变化.[结果]随着香榧种实膨大,假种皮中的蔗糖、葡萄糖、果糖先上升后下降,淀粉质量分数不断下降,至种