【摘 要】
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补体(Complement)是存在于动物体液中及细胞表面,经活化后可介导免疫和炎症反应的蛋白.本研究采用RACE技术首次从团头鲂(Megalobrama amblycephala) cDNA文库中克隆出C3和C9
【机 构】
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南京农业大学无锡渔业学院,无锡,214081;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部种质淡水渔业与种质资源利用重点实验室,无锡,214081;南京农业大学无锡渔业学院,无锡,214081;中国水产
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补体(Complement)是存在于动物体液中及细胞表面,经活化后可介导免疫和炎症反应的蛋白.本研究采用RACE技术首次从团头鲂(Megalobrama amblycephala) cDNA文库中克隆出C3和C9基因cDNA全长序列(MaC3和MaC9),并运用qRT-PCR技术检测了MaC3和MaC9基因在团头鲂不同组织中的表达情况和饥饿胁迫后在肝脏中的时序表达模式.结果 显示,MaC3和MaC9基因序列全长分别为5 378 bp和2 522 bp,5'UTR长为316 bp和8bp,YUTR长为133bp和480 bp,开放阅读框为4 929 bp和2 034 bp,分别编码1 642和677个氨基酸.氨基酸序列同源性分析表明,MaC3和MaC9分别与鲫鱼(Carassius auratus)补体C3和草鱼(Ctenopharyngodon idella)补体C9相似度较高,分别达78％和84％.实时荧光定量结果表明,MaC3和MaC9在脑、肝脏、脾脏、头肾、中肾、心脏、前肠、中肠、后肠、鳃、肌肉组织中均有表达且在肝脏中表达量最高,分别在肾脏和心脏中表达量最低.在实验周期21d和28 d,持续饥饿组团头鲂肝脏中补体C3和C9基因的表达量显著低于对照组(p＜0.05),但饥饿过量投喂组团头鲂C3和C9基因表达量显著高于对照组(p＜0.05),饥饿再投喂组的C3和C9基因表达量与对照组差异不显著.持续饥饿组的团头鲂肝细胞中细胞核模糊变形并且肝血窦扩张,有明显的炎症反应.研究结果表明,长期饥饿胁迫下团头鲂肝损伤且补体合成能力下降,导致团头鲂机体免疫应答受到抑制作用,本研究为团头鲂免疫防御系统的研究提供了重要资料.
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