华支睾吸虫表膜蛋白TP31.8的克隆、表达及免疫活性

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目的从华支睾吸虫cDNA文库扩增表膜蛋白31.8kDa(TP31.8)基因,克隆入表达载体pGEX-4T-1,诱导表达重组蛋白,纯化重组蛋白免疫大鼠获得特异性抗体,为后续功能研究奠定基础。方法以华支睾吸虫cDNA文库为模板,设计一对特异性引物,扩增华支睾吸虫TP31.8基因,扩增产物经EcoRI、XhoI双酶切后与做相应酶切的pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定,IPTG诱导重组蛋白表达,并对基因进行测序及比对分析。融合蛋白经谷胱甘肽Sepharose4B柱纯化后,用凝血酶
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