【摘 要】
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目的:探讨lncRNA TUG1对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)增殖、迁移、胶原合成的影响及作用机制.方法:对临床采集的健康牙周组织进行HPDLFs分离培养,观察形态学并鉴定细胞纯度.以lncRNA TUG1慢病毒(Lv-lncRNA TUG1)转染HPDLFs后检测lncRNA TUG1的表达水平,以CCK-8、划痕实验检测HPDLFs的增殖、迁移行为,以qRT-PCR测定胶原mRNA合成,Western blot测定TGF-β1/Smads蛋白的表达.结果:原代HPDLFs完整,呈现梭形,波形丝蛋
【机 构】
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首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京100038;北京积水潭医院,北京100035;首都医科大学附属北京同仁医院,北京100730
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目的:探讨lncRNA TUG1对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)增殖、迁移、胶原合成的影响及作用机制.方法:对临床采集的健康牙周组织进行HPDLFs分离培养,观察形态学并鉴定细胞纯度.以lncRNA TUG1慢病毒(Lv-lncRNA TUG1)转染HPDLFs后检测lncRNA TUG1的表达水平,以CCK-8、划痕实验检测HPDLFs的增殖、迁移行为,以qRT-PCR测定胶原mRNA合成,Western blot测定TGF-β1/Smads蛋白的表达.结果:原代HPDLFs完整,呈现梭形,波形丝蛋白呈阳性,角蛋白免疫细胞染色呈阴性.HPDLFs经慢病毒lncRNA TUG1转染后,lncRNA TUG1表达上调(P<0.01).CCK-8实验表明,慢病毒lncRNA TUG1转染细胞培养12 h、24 h和48 h时,细胞吸光度显著高于空病毒对照组和正常对照组(P<0.05或P<0.01).划痕实验表明,慢病毒lncRNA TUG1转染细胞的划痕面积显著低于空病毒对照组和空白对照组(P<0.01).qRT-PCR检测结果表明,慢病毒lncRNA TUG1转染细胞COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ和MMP-2表达水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01).Western blot测定TGF-β1、p-Smad3蛋白的相对表达水平明显高于空病毒对照组和空白对照组.结论:lncRNA TUG1通过上调TGF-β1信号通路促进HPDLFs的增殖、迁移和纤维化.
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