【摘 要】
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目的 探讨转录因子性别决定相关基因簇2(SOX2)对滋养层细胞迁移和侵袭的影响及其机制.方法 将HTR8-SVneo细胞分为3组:对照组、HTR8-SVneo-SOX2组和HTR8-SVneo-NC组,对照组细
【机 构】
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甘肃省妇幼保健院产科,甘肃兰州,730000
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目的 探讨转录因子性别决定相关基因簇2(SOX2)对滋养层细胞迁移和侵袭的影响及其机制.方法 将HTR8-SVneo细胞分为3组:对照组、HTR8-SVneo-SOX2组和HTR8-SVneo-NC组,对照组细胞不做任何处理,HTR8-SVneo-SOX2组和HTR8-SVneo-NC组分别将携带SOX2 cDNA重组表达载体Pcmv-3x-FLAG-SOX2和阴性对照Pcmv-3x-FLAG-vector转染至HTR8-SVneo细胞.以免疫组化法检测子痫前期(PE)和正常胎盘中SOX2蛋白表达水平;Transwell和划痕实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力;表达谱芯片技术分析HTR8-SVneo-SOX2与HTR8-SVneo细胞差异表达基因,染色质免疫共沉淀-测序技术筛选SOX2结合的基因,比较两种基因检测技术筛选结果.结果 正常胎盘与PE胎盘的SOX2蛋白表达评分分别为(2.28±0.25)和(7.68±1.42)分,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).对照组、HTR8-SVneo-NC组和HTR8-SVneo-SOX2组的侵袭细胞数量分别为(211.00±11.27),(216.33±2.08)和(402.00±7.81)个;这3组的细胞迁移率分别为(54.33±3.79)％,(57.33±2.31)％和(86.33±2.89)％,HTR8-SVneo-SOX2组与对照组和HTR8-SVneo-NC组相比,细胞侵袭数与迁移率均明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).与HTR8-SVneo细胞相比,SOX2过表达后可能通过调控142个基因影响细胞侵袭和迁移;SOX2主要结合的位置为基因间区,且通过调节182个基因影响细胞侵袭和迁移;与基因表达谱分析比较表明,SOX2可能通过调控22个基因影响HTR8-SVneo的侵袭和迁移.结论 SOX2在PE胎盘中高表达,过表达的SOX2可促进滋养层细胞的迁移与侵袭,SOX2可能调控22个基因参与增殖和迁移.
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