人穿孔素C肽段的单克隆抗体和免疫血清的制备和鉴定

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目的:制备人穿孔素特异性单克隆抗体和免疫血清。方法:利用基因重组技术获得穿孔素(PFP)C端125个氨基酸的肽段免疫Balb/c小鼠和家兔。经取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并用Western印迹和免疫组化法鉴定所制备的单克隆抗体。结果:获得4个稳定的分泌抗rhPFP-C的杂交瘤细胞株,腹水抗体的ELISA滴度为1∶3.2×103~1∶6.4×106。兔免疫血清的滴度为1∶3.2×104。结论:利用重组人穿孔素肽段可制备出高特异性、高滴度的单克
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