【摘 要】
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目的制备铜绿假单胞菌（PA）的外膜蛋白（Opr）D2多克隆抗体，探讨OprD2缺失与亚胺培南耐药的关系。方法常规酚-氯仿法提取PA的基因组DNA，PCR扩增OprI）2基因，构建原核表达质粒pRSET-OprD2，
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院传染科
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目的制备铜绿假单胞菌（PA）的外膜蛋白（Opr）D2多克隆抗体，探讨OprD2缺失与亚胺培南耐药的关系。方法常规酚-氯仿法提取PA的基因组DNA，PCR扩增OprI）2基因，构建原核表达质粒pRSET-OprD2，在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达目的蛋白，胶回收后制备兔多克隆抗体，应用该抗体检测临床分离的32株PA OprD2的表达情况。结果成功构建了OprD2原核表达载体，制备了特异性好的OprD2多克隆抗体。蛋白印迹法检测27株临床分离的耐亚胺培南PA，20株（74．1％）OprD2表达缺失，5株
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