弓形虫MIC6羧基端蛋白片段的表达及其多克隆抗体的制备

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuaile6789
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目的克隆表达刚地弓形虫微线体蛋白6羧基端蛋白片段(TgMIC6C),制备多克隆抗体。方法PCR扩增目的基因片段,克隆到pGEX-4T-1载体上,构建MIC6C/pGEX4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST—MIC6C融合蛋白,亲和层析融合蛋白;用纯化的融合蛋白混合免疫佐剂免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,纯化并分析抗体的特异性。结果构建了MIC6C/pGEX4T-1原核表达系统并获得纯化的GST—MIC6C融合蛋白;获得了抗目的蛋白的多克隆抗体,抗体能特异地识别目的蛋白,抗体效价为1:8000。结
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