探讨白细胞介素(IL)–35＋调节性B淋巴细胞(IL–35＋ Breg)在川崎病(KD)免疫发病机制中的作用。
方法急性期KD患儿32例，同年龄体检健康儿童28例为健康对照组。KD患儿分别于治疗前、治疗后取血备检。采用流式细胞术检测外周血IL–35＋ Breg、调节性T淋巴细胞(Treg)比例及程序性死亡因子配体1(PD–L1)、CD169、程序性死亡因子1(PD–1)、CD43、IL–12p35、EB病毒诱导基因3(IL–27EBI3)、IL–12受体β2(IL–12Rβ2)、IL–27受体α(IL–27Rα)、磷酸化信号转导和转录活化因子1(pSTAT1)、磷酸化信号转导和转录活化因子3(pSTAT3)蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD19＋细胞Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP–2)、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、vav1鸟嘌呤核苷酸交换因子(Vav)mRNA表达；酶联免疫吸附法检测血浆中IL–35、肿瘤坏死因子α(TNF–α)、IL–12水平。
结果1.急性期KD患儿外周血IL–35＋ Breg细胞比例较健康对照组显著降低[(5.79±2.60)%比(12.65±5.34)%; F＝19.23，P<0.05]，其胞内IL–12p35、IL–27EBI3、IL–10表达水平明显低于健康对照组(F＝9.70、14.30、7.08，P均<0.05)，经静脉注射丙种球蛋白(IVIG)治疗后显著上调[IL–35＋ Breg：(10.52±4.95)%；P<0.05]。2.急性期KD患儿Treg比例及其胞内IL–12p35、IL–27EBI3表达水平明显低于健康对照组[Treg：(4.12±1.51)%比(8.06±3.32)%；F＝19.70、17.69、38.22，P均<0.05]，其中Treg与IL–35＋ Breg细胞比例呈正相关(r＝0.69，P<0.05)，血浆IL–35水平及CD19＋ B淋巴细胞IL–12Rβ2、IL–27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达水平均显著降低(F＝8.09、7.54、7.69、5.89、12.59，P均<0.05)，经IVIG治疗后明显增高[Treg：(7.39±2.85)%; P均<0.05]。3.急性期KD患儿CD14＋细胞过表达PD–L1、CD169(F＝24.94、16.53，P均<0.05)，CD19＋细胞表面相关配体PD–1、CD43及其下游分子SHP–2、PTEN、Vav表达显著降低(F＝6.43、5.57、19.52、10.37、11.37，P均<0.05)，血浆TNF–α、IL–12水平明显高于健康对照组(F＝34.71、19.51，P均<0.05)，经IVIG治疗后均明显恢复(P均<0.05)。
结论IL–35＋ Breg细胞数量及功能异常可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要因素之一。