甲状腺微粒体过氧化物酶及其单克隆抗体的制备

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lw_hualei
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本工作共分3部分:①取健康人甲状腺组织,经匀浆、超声波处理及不同速度离心去除其中细胞碎片,胞核和线粒体,再经超速离心沉淀,即获得粗提的甲状腺微粒体过氧化物酶(TPO)。②以此粗提TPO免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/O细胞杂交,获得分泌抗TPO单抗的杂交瘤细胞系多株,经组化染色证明这些单抗能与人甲状腺微粒体结合。③用这些单抗与活化的Sepharose4B偶联,将粗提TPO作亲和层析,获两个洗脱峰,将洗脱液用邻甲基氧基苯酚法测定TPO活性,证明第二个峰有TPO活性,其比活性为277.78Gu/mg,纯度比粗提品高40倍。本研究对目前由于TPO抗原纯度不够而影响抗TM自身抗体检出率的难题可能有重要参考价值
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