论文部分内容阅读
目的克隆、表达土豆环氧化物水解酶基因，分析其活性包涵体。方法提取土豆总RNA，以反转录获得的cDNA为模板进行聚合酶链式反应（PCR），扩增得到土豆环氧化物水解酶基因，构建大肠杆菌表达质粒pET-EEH，将重组表达质粒pET-P．EH转化E．coli BL21（DE3）。结果SDS—PAGE分析表明，IPTG诱导表达的重组土豆环氧化物水解酶在各种温度下均主要以包涵体形式表达，只在15℃有微量可溶表达。酶活性分析表明，28℃表达的重组酶包涵体酶活性性为0．7U／mg。结论初步证实了存在活性包涵体的观点。