纯化作用对五味子木脂素抗氧化性的影响

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【目的】研究五味子木脂素在不同纯化程度下的抗氧化性能,为开发富集木脂素的五味子功能食品提供理论依据。【方法】采用微波-超声波联用法提取五味子木脂素,得木脂素粗提液;首先用AB-8大孔吸附树脂对粗提液初步纯化,用p H10、体积分数100%的乙醇进行洗脱;采用高效液相色谱进行定性分析,检测方法为:Venusil XBP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(B)-水(A),梯度洗脱条件:0~7 min(67%B)、7~13 min(67%~75%B)、13~22 min(75%~80%B)、22~30 min(80%~67%B),检测波长220 nm,流速0.8 m L·min-1,进样量10μL,柱温为室温;面积归一法计算木脂素纯度,粗提液中木脂素纯度为29.33%,大孔树脂初步纯化后的木脂素纯度为58.95%;再采用制备液相色谱进一步纯化粗提液,检测方法为:Adsorbosphere XL C18柱(250 mm×22 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-水(B),梯度洗脱条件:0~10 min(75%A)、10~15 min(75%~78%A)、15~38 min(75%~80%A),检测波长220 nm,流速10 m L·min-1,进样量3 m L,柱温为室温;经制备液相纯化后,得到4个木脂素单体,五味子醇甲纯度为95.40%,五味子酯甲纯度为98.85%,五味子甲素纯度为94.76%,五味子乙素纯度为96.44%;比较不同纯度组分木脂素的还原能力,对·O2-、·OH、H2O2、DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力,评价纯化作用对五味子木脂素抗氧化能力的影响。【结果】在0.1~0.5 mg·m L-1范围内,不同纯度组分的五味子木脂素均表现出一定的抗氧化能力,但均低于抗坏血酸;纯化后的木脂素抗氧化能力均低于未纯化的木脂素粗提液,制备液相得到的单体中,五味子乙素的抗氧化能力较强。【结论】五味子木脂素粗提液中含有多糖等成分,五味子多糖具有抗氧化能力;木脂素、多糖等成分协同作用,抗氧化能力强;经大孔树脂初步纯化后,除去了多糖等大分子物质,单独的木脂素抗氧化能力相对变弱。此结果说明,随着纯化程度增大,物质组分单一程度高,物质的生物活性不一定随之增强;制备液相得到的单体中,五味子乙素的抗氧化能力较强,原因可能与其联苯环、辛烯环上的取代基有关。
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