p38L12-TAT融合肽对山梨糖醇引起的ECV304细胞ATF2磷酸化的抑制作用

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chengqiantu

【摘要】

：

构建p38 Loop-12（L12）的TAT融合表达载体,纯化原核表达的p38L12融合蛋白并鉴定其在真核细胞内的功能.利用PCR方法分别扩增出p38L12及其“T-X-Y”双磷酸化位点的AF突变体p38L12（A

【作者】

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郭爱华刘志锋李海玉唐靖李志杰刘亚伟龚小卫刘靖华

【机构】

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南方医科大学病理生理学教研室和广东省功能蛋白质组学重点实验室

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2006年5期

【关键词】

：

Ⅰ型人免疫缺陷病毒转录激活蛋白丝裂原活化蛋白 LOOP 12 细胞转导系统 human immunodeficiency virus type-1 trans

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划（863计划）（No.2001AA234061）,广东省科技计划项目（NO.A1090202）,广州市科技计划项目（No.2001-Z-035-01-1）,广东省自然科学基金重点项目（No.13058）

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构建p38 Loop-12（L12）的TAT融合表达载体,纯化原核表达的p38L12融合蛋白并鉴定其在真核细胞内的功能.利用PCR方法分别扩增出p38L12及其“T-X-Y”双磷酸化位点的AF突变体p38L12（AF）片段,克隆入His标记的TAT-EGFP融合蛋白原核表达载体pHTE（pET14b-Gis-TATEGFP）,经酶切、测序鉴定正确后,将重组质粒转化原核表达菌,诱导表达纯化融合蛋白;将融合蛋白加入ECV304细胞后于荧光显微镜下观察并行Western印迹分析,检测融合蛋白的细胞内转导活性;通

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