芦荟大黄素通过Bax/Caspase-3信号通路调控肝癌细胞自噬作用研究

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目的:探讨芦荟大黄素通过B淋巴细胞癌-2基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信号通路调控肝癌细胞自噬的作用.方法:选用肝癌SMMC-7721细胞,设置SMMC-7721组、5氟尿嘧啶组、芦荟大黄素低、高剂量组(低、高剂量组).5氟尿嘧啶组加入5氟尿嘧啶至终浓度为80 μg/mL,低、高剂量组加入芦荟大黄素至终浓度分别为100 μg/mL、200 μg/mL.以上各组每孔设6个平行样,培养72 h.试验结束后,采用MTT法测定细胞增殖水平,吖啶橙染色观察细胞自噬水平,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,RT-PCR法及Western-blot法测定细胞Bax、Caspase-3基因和蛋白水平.结果:与SMMC-7721组比较,其余各组细胞存活率降低(P<0.05),自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组存活率降低(P<0.05),自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);与5氟尿嘧啶组比较,低、高剂量组细胞存活率升高(P<0.05),自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:芦荟大黄素能明显抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,诱导该细胞发生自噬和凋亡,且其机制与芦荟大黄素能促进Bax、Caspase-3mRNA及蛋白表达有关.
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