一种快速提取血吸虫虫卵方法的建立

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxx555xxx777
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为探索一种快速提取血吸虫虫卵并保持虫卵抗原性的方法,本研究用血吸虫尾蚴感染兔并收集其肝脏,分别用不同浓度的Na OH、不同温度和时间消蚀含有虫卵的肝脏匀浆液,以确定最佳提取虫卵条件。通过方阵法确定所提取虫卵的可溶性抗原最佳包被浓度,并对虫卵抗原灵敏度进行了检测。另外,通过测定75份阳性血吸虫水牛血清和60份阴性水牛血清,进一步检测了此法提取并制备抗原的灵敏性。结果表明,本研究所建立的方法在不同Na OH浓度、作用温度和作用时间下,对提取的虫卵均产生影响。Na OH浓度越高,作用时间越久,消蚀温度越高,对虫卵的破坏越显著,表现在虫卵内容物的凝聚和消融,虫卵的空壳化增多。3种不同浓度Na OH提取虫卵的抗原检测下限分别为1/800、1/1600、1/3200,较过筛法的抗原检测下限1/400有显著提高。对水牛的血清检测结果表明,用Na OH消蚀法提取的虫卵抗原检测血吸虫灵敏性是93%,比常规过筛法高5%,特异性是100%,比常规过筛法高3%。本研究结果表明Na OH消蚀法可快速提取高洁净度的虫卵并保持虫卵的抗原性不被破坏,该法提取虫卵的最佳Na OH浓度是5%~10%,作用温度是45℃左右,作用时间是5~10 min。在最佳条件下制备的虫卵较常规过筛法的纯净度高,虫卵得率也是常规过筛法的3倍以上。
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