捕获法检测嗜肺军团菌IgM抗体的建立及应用

来源 :中国煤炭工业医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:efan913
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目的建立一种捕获法检测嗜肺军团菌IgM抗体的方法。方法用羊抗人IgM抗体包被微孔板,选择辣根过氧化物酶标记的兔抗嗜肺军团菌抗体和培养的嗜肺军团菌抗原最适浓度,以西班牙VIRCELL公司PNEUMOSLIDE-M间接免疫荧光试剂盒为参照,优化样品稀释液和酶结合物稀释液的最佳配方。结果酶结合物工作浓度1/2 000、抗原浓度1/1 000为最适浓度,在样品稀释液中加入20%羊血清,在酶结合物稀释液中加入20%兔血清可以消除因使用多克隆抗体而引起的假阳性,假阳性率降低3.24%。建立的IgM捕获法与西班牙VIRCELL公司间接免疫荧光法的阳性符合率为93.26%(83/89),阴性符合率为93.67%(326/348),与其他呼吸道病原体IgM抗体没有显著交叉反应,不受类风湿因子的干扰。结论建立的捕获法检测嗜肺军团菌IgM抗体方法操作方便,与商品化间接免疫荧光试剂盒有较高的符合率,具有临床诊断价值。
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