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用双引物法对GI基因进行体外定点突变,构建了突变体Q20L和G247D。含突变基因的重组表达质粒pTKD-GIQ20L及pTKD-GIG247D在E.coti38菌株中表达。纯化的突变酶与野生型酶相比;(1)GIQ20L的最适反应温度下降5℃,热稳定性为野生型酶的78%,对义莪的亲和性增强;(2)GIG247D的酶活提高约33%,最适PH下降0.6个单位,但热稳定性降低,初步分析认为,Gln20位