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为进一步提高P450BM-3催化吲哚合成靛蓝的能力，在前期获得的突变酶D168L／E435T基础上引入V445A突变，获得突变酶D168L／E435T/V445A，该突变酶与D168L／E435T及V445A相比，对吲哚的亲和力分别降低41．5％及35．8％，转化数（Kcat）分别提高1．61倍及1.31倍，催化效率（Kcat Km-1）分别提高1．53倍及1．47倍；该突变酶对电子的耦合率也提高至24．7％，较D168L／E435T提高39．5％，较V445A提高64．7％，说明该突变酶在电子的利用率上