基于TLC和HPLC-CAD法比较分析天然和市售蜂蜜糖类成分

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目的:探讨糖类成分用于鉴别蜂蜜真伪的可行性。方法:通过对14批天然采集蜂蜜和14批市售蜂蜜中糖类成分比较,了解天然蜂蜜糖类特征。首先利用薄层色谱法(TLC法)对蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖等糖类成分进行快速鉴别,采用薄层硅胶板G60,展开剂为正丁醇-异丙醇-醋酸-水(7∶5∶1∶2),显色剂为苯胺-二苯胺-磷酸溶液;再利用高效液相色谱联用电喷雾检测器法(HPLC-CAD法)对果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖进行定量分析,采用氨基分析柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,进样量5μL,N2压力241.325 k Pa。结果:天然采集蜂蜜在TLC中具有特征条带且相似,主要为果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖;而3批市售蜂蜜样品中含不同于天然蜂蜜的寡糖条带,可能有外源性糖类掺杂。采用HPLC-CAD定量分析,果糖、葡萄糖、蔗糖及麦芽糖线性范围分别为16.4~493.0、17.4~521.0、0.72~62.3和0.68~64.0μg·mL-1,线性关系良好(r>0.998 1),平均回收率在87.0%~112.8%之间,RSD为0.7%~6.1%。14批天然蜂蜜和14批市售蜂蜜中果糖含量分别为43.5%~53.5%和45.4%~54.3%,葡萄糖含量分别为41.3%~50.3%和41.0%~50.2%,均无统计学差异(p>0.05)。此外,蜂蜜中还存在有少量蔗糖(0.41%~6.6%)和麦芽糖(0.64%~1.8%)。结论:天然蜂蜜主要含果糖、葡萄糖以及少量蔗糖和麦芽糖,可利用寡糖的存在与否,判断蜂蜜是否有外源性糖类掺入,以评价市售蜂蜜质量。
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