A组乙型溶血性链球菌DN aseB基因亚克隆及pET-28a(+)-DNaseB载体构建

来源 :福建师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：jerryweimao

【摘要】

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运用PCR扩增技术，以质粒pMD18-T-DNaseB为模板，扩增出0．5kb截短的DNaseB基因，先将该基因片段与pMD19-T载体连接，确定该序列正确并进行大量繁殖后，再将DNaseB基因定向克隆入pET-28a（＋）

【作者】

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潘琴王滔陈骏扬黄祖新

【机构】

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福建师范大学生命科学学院,发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室,福建省立医院儿科,福建省立医院儿科研究室

【出处】

：

福建师范大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

A组乙型溶血性链球菌 DNaseB基因亚克隆

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运用PCR扩增技术，以质粒pMD18-T-DNaseB为模板，扩增出0．5kb截短的DNaseB基因，先将该基因片段与pMD19-T载体连接，确定该序列正确并进行大量繁殖后，再将DNaseB基因定向克隆入pET-28a（＋）表迭载体中，构建新的原核表迭载体pET-28a（＋）-DNaseB，转化该重组质粒至受体菌E．coliDH5a中，采用SDS碱裂解法提取该质粒DNA，经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和核苷酸序列分析，证实插入的基因片段具有正确的DNaseB基因核苷酸序列，将pET-28a（＋）-DN

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