【摘 要】
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根据马链球菌兽疫亚种（Streptococcus equi subsp.zooepidemicus）猪源株ATCC35246株的类M蛋白基因序列,通过PCR技术,扩增出无信号肽的类M蛋白基因并定向克隆至表达载体pET-32a（＋）
【机 构】
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南京农业大学畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室
【基金项目】
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教育部科学技术研究重点项目（106091）,江苏省自然科学基金项目（BK2004106）
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根据马链球菌兽疫亚种（Streptococcus equi subsp.zooepidemicus）猪源株ATCC35246株的类M蛋白基因序列,通过PCR技术,扩增出无信号肽的类M蛋白基因并定向克隆至表达载体pET-32a（＋）中。重组质粒经酶切鉴定和测序后,在大肠杆菌BL21中表达,获得60kDa产物,Western blot显示,其与ATCC35246株多克隆抗血清反应,抗原性良好。以His亲和层析柱纯化重组类M蛋白作为抗原免疫8周龄的BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备了12株稳定分泌抗类
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